Thermo Scientific™ ScaI (10 U/l)

Beschreibung

Lambda-DNA verdaut mit ScaI, 0,7 % Agarose, 5 Spaltstellen

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

3'...T C A▵T G A...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität

• 1x Puffer ScaI:10 mM Bis-Tris-Propan-HCl (pH 6,5 bei 37°C), 10 mM MgCl₂, 100 mM KCl und 0,1 mg/mL BSA
• Bei 37°C inkubieren

Lagerungspuffer

• ScaI wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,5 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden

• Nach 50-fachem Verdau mit ScaI können über 80 % der DNA-Fragmente ligiert und über 90 % davon erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: möglicherweise Überlappung — blockiert

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA

• Es sind mindestens 20 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

Hinweis:

Bedingungen mit niedrigem Salzgehalt, hoher Enzymkonzentration, Glycerinkonzentration von >5 % oder pH-Wert von >8,0 können zu Star-Aktivität führen. Für den vollständigen Verdau superspiralisierter Plasmid-DNA kann die bis zu 20-fache Menge an ScaI gegenüber linearer DNA benötigt werden.