Urea, MP Biomedicals™

Harnstoff in Lösung steht im Gleichgewicht mit Ammoniumcyanat. Die Form, die mit den Aminogruppen von Proteinen reagiert, ist Isocyansäure. Harnstoff führt in Gegenwart von Hitze und Proteinen zur Carbamylierung der Proteine.

• Die Carbamylierung durch Isocyansäure beeinträchtigt die Proteincharakterisierung, da Isocyansäure mit dem Amino-Terminus von Proteinen reagiert und so die N-terminale Sequenzierung verhindert.
• Isocyansäure reagiert außerdem mit den Seitenketten von Lysin- und Argininresten, was zu einem Protein führt, das für viele enzymatische Verdauungen ungeeignet ist.
• Die Carbamylierung führt oft zu verwirrenden Ergebnissen, da Peptide unerwartete Retentionszeiten und Massen aufweisen.

Harnstoff ist ein mildes Mittel, das üblicherweise zur Denaturierung von Proteinen und als mildes Lösungsmittel für unlösliche oder denaturierte Proteine verwendet wird. Es eignet sich auch zur Renaturierung von Proteinen aus Proben, die bereits mit 6M Guanidinchlorid denaturiert wurden, wie z. B. Einschlusskörperchen.

• Es kann zusammen mit Guanidinhydrochlorid und Dithiothreitol (DTT) zur Rückfaltung denaturierter Proteine in ihre native oder aktive Form verwendet werden.
• Es wird häufig zur Extraktion des mitochondrialen Komplexes, bei der isoelektrischen Fokussierung und zweidimensionalen Elektrophorese sowie in Essigsäure-Harnstoff-PAGE-Gelen verwendet.

Weitere Anwendungsgebiete sind:

• In Zell- oder Gewebekulturmedien, um die Osmolalität zu erhöhen
• Als Düngemittel, aufgrund der leichten Verfügbarkeit von Stickstoff
• In Tierfutter
• Reagierten mit Aldehyden zur Herstellung von Harzen und Kunststoffen
• Kondensiert mit Malonsäureester zu Barbitursäure
• In der Papierindustrie wird es zur Weichmachung von Zellulose verwendet.
• Als Diuretikum
• Um die Wirkung von Sulfonamiden zu verstärken
• Als Antiseptikum