Thermo Scientific™ Pierce™ detergenskompatibler Bradford-Assay-Kit

Der Thermo Scientific Pierce Detergens-kompatible Bradford Assay-Kit ist eine schnelle und gebrauchsfertige Modifikation der bekannten Bradford Coomassie-Farbstoffbindungsmethode für die Gesamtproteinquantifizierung. Urheberrechtlich geschützte Zusätze zum Bradford-Reagenz machen es kompatibel mit bis zu 1%igen oder höher dosierten Detergenzien und Lysereagenzien, die üblicherweise in der Life-Sciences-Forschung verwendet werden, einschließlich Triton™ X-100 und NP-40.

• Praktisch – detergensfreie Standardkurve
• Flexibel – kompatibel mit Proben mit und ohne Detergens
• Minimaler Probeneinsatz – nur 10 μl für Mikrotiterplattenverfahren
• Kolorimetrisch – Messung mit einem Standard-Spektralphotometer oder Plattenlesegerät (595 nm)
• Anwenderfreundlich – nur ein Reagenz; die Vorbereitung von Verfahrensreagenzien entfällt
• Schnell – 10-minütige Inkubation bei Raumtemperatur
• Weiter Bereich – Erkennung von Proteinkonzentrationen im Bereich von 2 bis 1.500 μg/ml

Ähnlich wie bei der Bradford-Methode bindet der Coomassie-Farbstoff Protein in einem sauren Medium und bewirkt eine sofortige Verschiebung des Absorptionsmaximums von 465 nm zu 595 nm mit einem gleichzeitigen Farbumschlag von grün nach blau. Darüber hinaus ist der Assay in nur 10 Minuten abgeschlossen.
Der Proteinassay kann entweder im Reagenzglas oder auf Mikrotiterplatten durchgeführt werden. Der Standardarbeitsbereich liegt bei bis 100 bis 1500 μg/ml mit bis zu 1%igem Detergens (in einigen Fällen auch höher). Die Proteinkonzentrationen werden anhand von Absorptionen einer Reihe von Standardproteinverdünnungen, typischerweise Rinderserumalbumin (BSA), geschätzt, die zusammen mit den unbekannten Proben untersucht werden. Da die Farbreaktion mit Coomassie-Farbstoff nicht linear mit steigender Proteinkonzentration verläuft, muss bei jedem Assay eine Standardkurve erstellt werden. Die Standards können direkt verwendet werden, ohne dass sie in dem gleichen Detergens wie die Testproben aufbereitet werden müssen.