Thermo Scientific™ Maxima™ Erststrang-cDNA-Synthesekit für RT-qPCR

Beschreibung

Das Thermo Scientific™ Maxima™ 5X Reaktionsgemisch ist ein Bestandteil der Maxima Erststrang-cDNA-Synthesekits für die RT-qPCR (K1671/K1672/K1641/K1642 ) und kann separat erworben werden. Das 5X-Reaktionsgemisch besteht aus Reaktionspuffer, dNTPs, Oligo (dT)18 und zufällig ausgewählten Hexamer-Primern.

Im Kit ist die Maxima Reverse Transkriptase enthalten — ein leistungsstarkes Enzym, das durch die In-vitro-Evolution von M-MuLV RT hergestellt wurde. Das Enzym zeichnet sich durch eine hohe Thermostabilität und Robustheit aus und bietet im Vergleich zur Wildtyp M-MuLV RT eine höhere cDNA-Syntheserate. Das Kit enthält das Maxima Enzymgemisch, 5x Reaktionsgemisch und Nuklease-freies Wasser. Das Maxima Enzymgemisch enthält Maxima Reverse Transkriptase und RiboLock RNase-Inhibitor. Der rekombinante RiboLock RNase Inhibitor schützt RNA-Matrizen wirkungsvoll vor Zersetzung durch RNasen A, B und C bei Temperaturen bis zu 55 °C. 5X Reaktionsgemisch enthält die weiteren Reaktionskomponenten: Reaktionspuffer, dNTPs, Oligo (dT)₁₈ als auch Random Hexamer Primer. Nuklease-freies Wasser zur Reaktionsvorbereitung und Verdünnung der Proben-RNA ist im Lieferumfang enthalten. Mit Hilfe geeigneter Qualitätsprüfungen wurde sichergestellt, dass keine Endo-, Exodesoxyribonukleasen, Ribonukleasen und Phosphatasen vorhanden sind.

Beim Thermo Scientific Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR handelt es sich um ein anwenderfreundliches System, das für die cDNA-Synthese in 2-stufigen, quantitativen Echtzeit-PCR-Anwendungen (RT-qPCR) optimiert wurde. Im Kit enthalten ist die Maxima Reverse Transkriptase (RT) – ein leistungsstarkes Enzym, das durch die In-vitro-Evolution von M-MuLV RT hergestellt wurde. Das Enzym zeichnet sich durch eine hohe Thermostabilität und Robustheit aus und bietet im Vergleich zur Wildtyp M-MuLV RT eine höhere cDNA-Syntheserate.
Das Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR ermöglicht eine reproduzierbare cDNA-Synthese aus unterschiedlichen Mengen von Gesamt-RNA (1 pg bis 5 μg) bei erhöhten Temperaturen (42 bis 65 °C). Die Synthesereaktion kann innerhalb von 15 bis 30 Minuten abgeschlossen werden. Komponenten des Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR sind bereits vorgemischt. Dies spart Zeit und verringert die Möglichkeit von Fehlern beim Pipettieren.
Das neue Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit mit dsDNase ermöglicht einen stark vereinfachten Arbeitsablauf, der die Entfernung genomischer DNA und die cDNA-Synthese in einem Ein-Röhrchen-Verfahren vereint. Das Kit enthält eine neuartige doppelsträngige spezifische DNase (dsDNase), die entwickelt wurde, um kontaminierende genomische DNA aus RNA-Präparaten innerhalb von 2 Minuten zu entfernen, ohne die Qualität oder Menge der RNA zu beeinträchtigen. Die hochspezifische Aktivität gegenüber doppelsträngiger DNA gewährleistet, dass einsträngige DNA (wie cDNA und Primer) nicht gespalten wird und mit dsDNase behandelte RNA direkt zur reversen Transkription hinzugefügt werden kann.
Besondere Eigenschaften
• Integrierter Schritt zur Entfernung von gDNA
• Hohe Ausbeuten von cDNA mit voller Länge (bis zu 20 kb)
• Effiziente cDNA-Synthese über einen breiten Temperaturbereich von 42 °C bis 65 °C
• Erhöhte Syntheserate – vollständige cDNA-Synthese in 15–30 Minuten
• Hohe Empfindlichkeit und Spezifität
Anwendungen
• 2-schrittige RT-PCR
• 2-schrittige RT-qPCR
Enthält
Inhalt des Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit für die RT-qPCR:
• Maxima Enzymgemisch (Maxima Reverse Transkriptase und RiboLock RNase-Inhibitor)
• 5x Reaktionsgemisch (Reaktionspuffer, dNTPs, Oligo [dT]₁₈ sowie Random Hexamer Primer)
• Nukleasefreies Wasser Inhalt des Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit mit dsDNase
• Maxima Enzymgemisch (Maxima Reverse Transkriptase und RiboLock RNase-Inhibitor)
• 5x Reaktionsgemisch (Reaktionspuffer, dNTPs, Oligo [dT]18 sowie Random Hexamer Primer)
• DsDNase
• 10X dsDNase-Puffer
• Nukleasefreies Wasser Weitere Informationen zu den Reaktionskomponenten
Rekombinanter RiboLock RNase-Inhibitor im Maxima Enzymgemisch enthalten, schützt RNA-Matrizen bei Temperaturen bis zu 55 °C wirksam vor der Zersetzung durch die RNasen A, B und C.
Oligo(dT)₁₈ sowie Random Hexamer Primer sind im Kit inkludiert Die Random Hexamer-Primer binden nicht spezifisch und haben die Aufgabe, cDNA von allen RNAs in einer RNA-Gesamtpopulation zu synthetisieren. Der Oligo(dT)₁₈ Der Primer bindet selektiv an das 3-Ende der Poly(A)-RNA, was dazu führt, dass cDNA nur von mRNA mit Poly(A)-Schwanz synthetisiert wird. Für Synthese von bestimmten Sequenz können zudem genspezifische Primer eingesetzt werden.
Wasser, nukleasefrei ist zur Reaktionsvorbereitung und Verdünnung der Proben-RNA im Lieferumfang enthalten. Mit Hilfe geeigneter Qualitätsprüfungen wurde sichergestellt, dass keine Endo-, Exodesoxyribonukleasen, Ribonukleasen und Phosphatasen vorhanden sind.
Maxima Universal Erststrang cDNA-Synthesekit
Nur in den USA und Kanada erhältlich.
Das Maxima Universal First Strand cDNA Synthesis Kit unterscheidet sich vom Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit durch einen separaten Kit c

Gefahren: Keine
>Qualitätskontrolle:
>•Funktional getestet in zweistufiger RT-qPCR unter Verwendung verschiedener RNA-Transkript-Startmengen (5 ng bis 0.5 fg) durch reverse Transkriptionsreaktionen und anschließend durch Amplifikation mit Maxima SYBR Green/ROX qPCR Master Mix.
>•Die Effizienz liegt im Bereich von 90 bis 110 %, die Steigung liegt zwischen -3.09 und -3.58 mit einem Korrelationskoeffizienten von > 0.99.
> Versandbedingungen: Trockeneis
> Lagerbedingungen: -20 °C

Zweistufige RT-qPCR.

Bestellinformation

Bestellungen, die Montags bis Mittwochs aufgegeben werden, werden am nächsten Tag verschickt; Bestellungen, die donnerstags und freitags aufgegeben werden, werden am darauffolgenden Montag verschickt.