Thermo Scientific™ GeneJET FFPE DNA Purification Kit

Das Kit nutzt eine Membrantechnologie auf Silikabasis in Form einer praktischen Spinsäule, wodurch die Notwendigkeit für teure Harze, toxische Phenol-Chloroform-Extraktionen oder langwierige Alkoholfällungen entfällt. Das Standardverfahren dauert nach der Zelllyse weniger als 20 Minuten und erbringt gereinigte DNA mit einer Länge von mehr als 30 kb. Isolierte DNA kann direkt für PCR, Southern Blot und Enzymreaktionen verwendet werden.

Formalinfixierte und paraffineingebettete Gewebeproben (FFPE) werden routinemäßig aus humanen chirurgischen Gewebeproben hergestellt, sodass sie jahrelang in Archiven aufbewahrt werden können. Das Thermo Scientific GeneJET FFPE DNA Purification Kit dient zur schnellen und bequemen Aufreinigung von DNA aus verschiedenen Mengen archiviertem FFPE-Gewebe. Für die genomische DNA-Extraktion können bis zu 8 Schnitte (10 μm Dicke) von FFPE-Proben aus verschiedenen Geweben ohne Inkubation über Nacht verwendet werden. Die Eliminierung toxischer Reagenzien, die häufig für die Entparaffinisierung verwendet werden (d. h. Xylol), ermöglicht ein sicheres DNA-Aufreinigungsverfahren mit hohen DNA-Ausbeuten und ausgezeichneter Qualität. Jedes Präparat gewinnt bis zu 8 μg genomische DNA zurück, die in Volumina von 20 μl eluiert werden kann und konzentrierte Proben ermöglicht. Aufgrund der hohen Effizienz beim Decrosslinking zeigt qualitativ hochwertige gereinigte DNA zuverlässige Leistung in empfindlichen Downstream-Prozessen wie qPCR, PCR (Amplikone bis 1 kb) oder NGS-Bibliotheksvorbereitung.
Besondere Eigenschaften
•Hochwertige DNA – Geeignet für PCR und qPCR
•Schnell – Das Verfahren kann innerhalb von 2 Stunden abgeschlossen werden
•Sicher – Nicht toxische Lösungsmittel
•Effizient – Ausbeute von bis zu 8 μg aufgereinigter DNA
Anwendungen
• PCR
• qPCR
• NGS-Bibliotheksvorbereitung
Enthält
• Proteinase-K-Lösung
• RNase A-Lösung
• Verdaupuffer
• Bindungspuffer
• Waschpuffer I (konz.)
• Waschpuffer II (konz.)
• Elutionspuffer
• GeneJET DNA-Aufreinigungssäulen & Entnahmeröhrchen
• Entnahmeröhrchen
• Detailliertes Protokoll

Gefährlich: Nein
>Qualitätskontrolle:
>•Das GeneJET Aufreinigungskit für genomische DNA isoliert genomische DNA aus 200 μl Blut und 5 mg Säugetiergewebe gemäß den empfohlenen Protokollen.
>• Die aufgereinigte genomische DNA hat ein A_260/280-Verhältnis von ≥1,7.
>•Nach der Agarose-Gelelektrophorese und der Ethidiumbromidfärbung ist ein einzelnes Band von mehr als 30 kb zu sehen.
>• Gereinigte genomische DNA wird durch PCR-Amplifikation eines Single-copy-Gens und Verdau mit FastDigest Restriktionsenzymen ausgewertet.
> Lagerbedingungen: Umgebungstemperatur

Isolierte genomische DNA eignet sich bestens für die Verwendung in gängigen molekularbiologischen Verfahren, wie z. B.:—PCR und qPCR, —FastDigest und konventioneller Restriktionsverdau, —Southern Blot.