Thermo Scientific™ Phusion U Green Hot Start DNA Polymerase

Beschreibung

Thermo Scientific Phusion U DNA-Polymerase ist ein neuartiges, speziell entwickeltes High-Fidelity-Enzym, das mithilfe der Fusionstechnologie entwickelt wurde. Durch eine proprietäre Mutation in der sogenannten dUTP-Bindungstasche von Phusion überwindet Phusion U eine wichtige Einschränkung von Proofreading-Enzymen, denn es ist in der Lage, dUTP zu integrieren und Uracil in DNA-Templates durchzulesen.
Neben der Uracilanwendung bietet Phusion U selbstverständlich alle Eigenschaften anderer Phusion DNA-Polymerasen wie hohe Genauigkeit, Geschwindigkeit, Fähigkeit zur Amplifikation langer Amplikons bis zu 20 kb und eine hohe Spezifität mit auf Affibody basiertem Heißstart. Diese Merkmale machen die Phusion U Hot Start DNA-Polymerase zu einer hervorragenden Wahl für wichtige Anwendungen wie die Amplifikation von Bisulphit-umgewandelter oder beschädigter DNA sowie die Verwendung der Kontrolle der Verschleppungskontamination.
Phusion U Hot Start DNA-Polymerase ist auch in den Formaten Master Mix und Green erhältlich. Phusion U Hot-Start PCR Master Mix ist eine praktische 2X Mischung, die die Anzahl der Pipettierschritte minimiert. Der Anwender muss lediglich das Template und die Primer zugeben. Das Phusion U Green-Format ist eine Kombination aus Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase und 5X Phusion Green-Puffer. Die Puffer enthalten ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen von PCR-Produkten auf ein Gel. Der Farbpuffer inhibiert die Phusion U nicht und ist mit Downstream-Anwendungen wie DNA-Sequenzierung, Ligation und Restriktionsverdau kompatibel.

Besondere Eigenschaften

• Genauigkeit – DNA-Polymerase mit extrem hoher Wiedergabetreue (25x Taq)
• Uracil-Toleranz – entwickelt zur Integration von dUTP und zur Amplifikation von Uracil-enthaltenen Templates
• Spezifität – Heißstart für weniger unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau
• Geschwindigkeit – kurze Extensionszeiten (15 bis 30 s/kb)
• Direkte Beladung der PCR-Produkte auf die Gele

• Amplifikation von Bisulphit-konvertierter DNA
• Amplifikation geschädigter oder alter DNA
• Kontrolle gegen Verschleppen von Kontaminationen
• Uracil-excision-basierte (USER) Klonierungsmethoden

• Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase, 2 E/μl
• 5X Phusion HF-Puffer
• 5X Phusion GC-Puffer
• DMSO

• Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase, 2 E/μl
• 5X Phusion Green HF-Puffer
• 5X Phusion Green GC-Puffer
• DMSO

• 2X Phusion U PCR Master Mix (Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase, 2X Reaktionspuffer, 3 mM MgCl₂, je 400 μM dATP, dTTP, dCTP und dGTP)
• Wasser, nukleasefrei

Gefahren:Keine
Lagerpuffer: 20 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25 °C), 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM KCl, Stabilisatoren und 50 % Glycerin.
Lagerungsbedingungen: -20 °C