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TaqMan™ TaqMan™ Advanced miRNA cDNA Synthese-Kit

Product Code. 15451034 Shop All Applied Biosystems Products
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Menge:
50 Reaktionen
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Das Kit nutzt 3'-Poly-A-Polyadenylierung und 5'-Ligation einer Adaptorsequenz zum beidseitigen Erweitern der reifen miRNA vor der reversen Transkription.

Das Applied Biosystems™ TaqMan™ Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit nutzt die universelle chemische Reaktion zur reversen Transkription (RT), um cDNA-Matrizen herzustellen, die mit TaqMan™ Advanced miRNA Assays für den Nachweis und die Quantifizierung reifer menschlicher miRNA in biologischen Proben verwendet werden können.

Das TaqMan Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit nutzt 3'-Poly-A-Polyadenylierung und 5'-Ligation einer Adaptorsequenz zum beidseitigen Erweitern der reifen miRNA vor der reversen Transkription. RT-Universalprimer erkennen die an den erweiterten 5'- und 3'-Enden vorhandenen universellen Sequenzen der reiferen miRNAs. Alle reifen miRNAs in der Probe werden in cDNA umgeschrieben

Zur Verbesserung des Nachweises niedrig exprimierter miRNAs wird die cDNA dann mit miR-Amp Universalprimern und dem miR-Amp Master Mix amplifiziert, um die Menge der cDNA für jedes Ziel gleichmäßig zu erhöhen, was die relative Expressionsunterschiede aufrechterhält. Im Gegensatz zur herkömmlichen Preamplifikation erkennen miR-Amp Universalprimer universelle Sequenzen, die allen reifen miRNAs an den 5'- und 3'-Enden hinzugefügt wurden, womit sichergestellt wird, dass keine unverhältnismäßige Amplifikation erfolgt.

  • Empfindlichkeit: eine hohe Empfindlichkeit ermöglicht die Quantifizierung niedrig exprimierter miRNAs, insbesondere in biologischen Flüssigkeiten wie Plasma und Serum sowie in Gewebe
  • Flexibilität: Die universelle RT-Chemie erzeugt universelle cDNA-Matrizen für sämtliche in der Probe vorhandene miRNAs, was wiederum zu mehr Flexibilität bei Ihrem Studienaufbau führt
  • Probeneinsparung: erfordert nur 2 μl Plasma/Serum und erzeugt ausreichend cDNA für 600 qPCR-Reaktionen (20 μl) bzw. 1200 qPCR-Reaktionen (10 μl)
  • Spezifität: Der 5'-Ligationsschritt ermöglicht die Unterscheidung von Einzelbasenpaaren entlang der gesamten miRNA-Sequenz, einschließlich schwer zu erkennender Fehlpaarungen am 5'-Ende
  • Gold-Standard TaqMan-Chemie: Dieses Kit dient zur Verwendung mit TaqMan™ Advanced miRNA Assays für qPCR, die auf dem branchenweit führenden Bioinformatik-Versuchsplanungs-Pipeline- und Validierungssystem von Thermo Fisher Scientific aufbauen und auch innerhalb eng verwandter miRNA-Familien zu einer hohen Spezifität und minimalen Kreuzreaktivität beitragen.

Order Info

Hinweis: Das TaqMan Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit ist nicht mit TaqMan MicroRNA Assays der ersten Generation für qPCR kompatibel. Zur umgekehrten Transkription von miRNA-Targets mit miRNA-spezifischen RT-Primern. Versandbedingungen: Trockeneis

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Specifications

Inhalt und Lagerung • 10X PolyA-Puffer
• ATP, 10 mM
• PolyA-Enzym, 5U/μl
• 5X Ligasepuffer
• RNA-Ligase, 10 U/μl
• 50 % PEG 8000
• 25X Ligationsadapter
• 10X RT-Enzym-Mix
• 20X Universal-RT-Primer
• dNTP-Mix, 100 mM
• 20X miR-Amp Primer-Mix
• 5X RT-Puffer
• 2X miR-Amp Mastermix

Alle bei -5 bis -30 °C lagern, außer 2X miR-Amp Mastermix, der bei 2–8 °C gelagert wird
Nachweisverfahren Primer-Sonde
GC-Rich PCR Performance Hoch
PCR-Methode qPCR
Reaktionsgeschwindigkeit Standard
Zur Verwendung mit (Geräte) 7500 System, 7500 Fast System, 7900HT System, StepOne™, StepOnePlus™, ViiA™ 7 System, QuantStudio™ 3, QuantStudio™ 5, QuantStudio™ 6 Flex, QuantStudio™ 7 Flex, QuantStudio 6 Pro, QuantStudio 7 Pro, QuantStudio™ 12k Flex, QuantStudio™ Absolute Q Digital PCR System
Optimale Reaktionstemperatur 42 °C
Produktlinie TaqMan™
Produkttyp cDNA-Synthese-Kit
Menge 50 Reaktionen
Reverse Transkriptase SuperScript™ III
Versandbedingung Trockeneis
Zur Verwendung mit (Anwendung) microRNA-Analyse
Anzahl Reaktionen 50 cDNA synthesis reactions / 600 qPCR reactions
Reaktionsformat Separate Komponenten
Probentyp RNA
Volumen 10 μl
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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

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