Thermo Scientific™ SureQuant™ Phosphopeptide Suitability Standards

Die spezifischen Phosphopeptide wurden im SureQuant Multisignalweg-Phosphopeptid-Standard ausgewählt, um biologisch relevante Phosphorylationsstellen für 89 Schlüsselproteinen aus sieben verschiedenen Signalwegen abzudecken, einschließlich EGFR/HER-, RAS-MAPK-, PI3K/AKT/mTOR-, AMPK-, Tod/Apoptose- und Spannungssignale (p38/SAPK/JNK). Für optimale Ergebnisse sollte die MS-Probenvorbereitung eine Phosphopeptid-Anreicherung mit dem standardmäßigen Spike-In vor der MS-Probenvorbereitung (1 pmol) oder nach der Phosphopeptid-Anreicherung (0,8 pmol) beinhalten. Die Möglichkeit, diese Ziele gleichzeitig in einer einzigen Probe zu überwachen und zu quantifizieren, stellt ein leistungsstarkes Werkzeug für die Beurteilung normaler und abnormaler Signalweg-Aktivität dar.

Die Phosphopeptide, die für den SureQuant Phosphopeptid-Eignungsstandard ausgewählt wurden, stellen relevante Proteine aus wichtigen Signalwegen dar, die Serin, Threonin und Tyrosinphosphorylation enthalten. Die 20 Phosphopeptide verfügen über einen breiten Bereich an Retentionszeiten und wurden für die Verwendung mit Phosphopeptid-Proben entwickelt, um die Systemleistung zu beurteilen und die Vorhersage von Peptid-Retentionszeiten zur Maximierung der Phosphopeptid-Identifizierungen zu verbessern.

Die Merkmale beinhalten:
• Optimierung – validierte Mischung aus 131 HeavyPeptide AQUA Basic phosphorylierten Peptiden (SureQuant Multipath Standard) oder 20 HeavyPeptide AQUA Basic Phosphopeptiden (SureQuant Eignungsstandard)
• Multiplex – geeignet für die relative Quantifizierung von Phosphorylationsereignissen für 89 Schlüsselproteine in sieben zellulären Signalwegen (SureQuant Multipath Standard)
• Prädiktiv – Bereich von Peptiden mit steigenden hydrophoben Eigenschaften für die Methodenoptimierung und die Berechnung der Peptid-Retentionszeiten
• Überwachung – ausgezeichnetes QC-Assay-Hilfsmittel für die Qualitätsbewertung der LC- und MS-Geräteleistung (SureQuant Eignungsstandard)
• convenuen Praktisch – Verfügung gestellt in einem gebrauchsfertigen Flüssigformat

Anwendungen:
• Standard für datenabhängige Erfassung (DDA)
• Standard für zielgerichtete MS (z. B. SRM, PRM)
• Optimierung von LC-Parametern
• Identifizierung des gesamten Peptid-Elutionsfensters
• Optimierung von MS-Parametern

Für optimale Ergebnisse sollte die MS-Probenvorbereitung eine Phosphopeptid-Anreicherung beinhalten. Wir empfehlen die Verwendung des EasyPep Maxi MS Probenvorbereitungs-Kits (Kat.- Nr. A45734) in Kombination mit den High Select Phosphopeptid-Anreicherungs-Kits (Kat.- Nr. A32992, A32993 oder A52283) für die Probenvorbereitung. Standardisierte Methoden und Datenprozessvorlagen werden für eine optimierte Datenerfassung und -analyse bereitgestellt.