Invitrogen™ SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit

Das SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit ist für die Synthese von Erststrang-cDNA direkt aus einem Säugetierzelllysat optimiert, ohne zuvor die RNA zu isolieren. Lyse und reverse Transkription werden im gleichen Röhrchen durchgeführt, und die daraus resultierende Erststrang-cDNA ist für PCR und qPCR einsatzbereit.

Zu den Merkmalen des SuperScript IV Kits zählen:
• Kompatibel mit einer Vielzahl von Säugetierzelltypen, die unter verschiedenen Behandlungsbedingungen kultiviert wurden
• Einzelröhrchenformat minimiert Reagenzienverlust, Probenverlust und Behandlungszeit
• Das Gesamtlysatvolumen wird bei der Erststrang-Synthesereaktion für cDNA verwendet, wodurch eine begrenzte Anzahl von Zellen mit höheren Erträgen erzielt wird und seltene Transkripte nachgewiesen werden können
• Qualitativ hochwertige cDNA, die für die Verwendung in einer Vielzahl von Anwendungen erzeugt wurde, einschließlich PCR und qPCR
• Einfaches Protokoll, das etwa 37 Minuten dauert
• Kompatibel mit dem TaqMan und SYBR Green qPCR-Mastermix von verschiedenen Herstellern
• Optimierte Leistung für 1 – 10.000 Zellen pro Probe, Ergebnisse wie bei aufgereinigter RNA

Das SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit enthält SuperScript IV reverse Transkriptase. Merkmale dieses Enzyms:
• Reduzierte RNase H-Aktivität
• Höhere thermische Stabilität
• Hohe cDNA-Ausbeute bei der Erststrang-Synthesereaktion für eine höhere Empfindlichkeit und einen verbesserten Nachweis seltener Transkripte
• Überlegene Toleranz gegenüber verschiedenen RT-Inhibitoren

SuperScript IV reverse Transkriptase ist eine ausgezeichnete Wahl für alle RT-PCR- und qRT-PCR-Anwendungen. Proprietäre MMLV-Mutante mit hervorragender Stabilität und Zuverlässigkeit bei RT-Reaktionen. Deutliche Verbesserung der Inhibitorresistenz, Prozessivität und Reaktionsgeschwindigkeit im Vergleich zur SuperScript III reversen Transkriptase bei gleichzeitiger Bewahrung aller Vorteile des vorherigen Enzyms, einschließlich erhöhter Thermostabilität, hocheffizienter Synthese von cDNA in voller Länge und reduzierter RNase-Aktivität.

Funktionsweise
Bei der herkömmlichen RT-PCR muss zuerst RNA aus Zellen in einem sehr zeitaufwändigen Verfahren isoliert werden, was zu Materialverlust führen kann. Mit dem SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit werden die Zellen lysiert und die cDNA aus dem Lysat in einem einzigen Röhrchen mit minimalem Aufwand und ohne Probenverlust erzeugt. Die DNase I-Behandlung ist ein optionaler Schritt und kann zur Entfernung genomischer DNA vor der Erststrang-Synthese verwendet werden. Dieses Kit wurde für kleine Zellproben optimiert, von 10.000 Zellen bis hin zu einer einzelnen Zelle.