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Invitrogen™ SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit

Optimiert für die Synthese von Erststrang-cDNA direkt aus einem Säugetierzelllysat, ohne zuvor die RNA zu isolieren. Lyse und reverse Transkription werden im gleichen Röhrchen durchgeführt, und die daraus resultierende Erststrang-cDNA ist für Klonierung, PCR und qPCR einsatzbereit.
Marke: Invitrogen™ 11750150
Beschreibung
Merkmale des SuperScript™ IV Kits:
- Kompatibel mit einer Vielzahl von Säugetierzelltypen, die unter verschiedenen Behandlungsbedingungen kultiviert werden
- Das Einzelröhrchenformat minimiert den Reagenzienverlust, den Probenverlust und die Bearbeitungszeit
- Das Gesamtlysatvolumen wird bei der Erststrang-Synthesereaktion für cDNA verwendet, wodurch eine begrenzte Anzahl von Zellen mit höheren Erträgen erzielt wird und seltene Transkripte nachgewiesen werden können
- Erzeugt hochwertige cDNA für die Verwendung in einer Vielzahl von Anwendungen, einschließlich Klonierung, PCR und qPCR
- Einfaches Protokoll, das etwa 37 Minuten dauert
- Kompatibel mit dem TaqMan™ und SYBR Green qPCR-Mastermix von verschiedenen Herstellern
- Optimierte Leistung für 1 – 10.000 Zellen pro Probe; Ergebnisse wie bei aufgereinigter RNA
Das SuperScript™ IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit enthält SuperScript™ IV reverse Transkriptase. Merkmale dieses Enzyms:
- Reduzierte RNase H-Aktivität
- Höhere thermische Stabilität
- Hohe cDNA-Ausbeute bei der Erststrang-Synthesereaktion für eine höhere Empfindlichkeit und einen verbesserten Nachweis seltener Transkripte
- Überlegene Toleranz gegenüber verschiedenen RT-Inhibitoren
SuperScript™ IV reverse Transkriptase ist eine ausgezeichnete Wahl für alle RT-PCR- und qRT-PCR-Anwendungen. Firmeneigener MMLV-Mutant mit hervorragender Stabilität und Zuverlässigkeit bei RT-Reaktionen. Deutliche Verbesserung der Inhibitorresistenz, Prozessivität und Reaktionsgeschwindigkeit im Vergleich zur SuperScript™ III reversen Transkriptase bei gleichzeitiger Bewahrung aller Vorteile des vorherigen Enzyms, einschließlich erhöhter Thermostabilität, hocheffizienter Synthese von cDNA in voller Länge und reduzierter RNase-Aktivität.
Funktionsweise
Bei der herkömmlichen RT-PCR muss zuerst RNA aus Zellen in einem sehr zeitaufwändigen Verfahren isoliert werden, was zu Materialverlust führen kann. Mit dem SuperScript™ IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit werden die Zellen lysiert und die cDNA aus dem Lysat in einem einzigen Röhrchen mit minimalem Aufwand und ohne Probenverlust erzeugt. Die DNase I-Behandlung ist ein optionaler Schritt und kann zur Entfernung genomischer DNA vor der Erststrang-Synthese verwendet werden. Dieses Kit wurde für kleine Zellproben optimiert, von 10.000 Zellen bis hin zu einer einzelnen Zelle.

Spezifikation
• SuperScript IV CellsDirect Lyselösung (2x 1,25 ml) • SuperScript IV CellsDirect Stopplösung (1x 250 µl) • Lyseverstärker (1x 25 µl) • Dnase I (1x 55 µl) • SuperScript IV RT Mastermix (1x 400 µl) • SuperScript IV RT-Negtivkontrolle (1x 400 µl) Lagerung bei –20 °C. |
|
Hoch | |
Reverse Transkription | |
50 °C | |
SuperScript IV | |
Trockeneis | |
cDNA (Erststrang) | |
Reaktionsgemisch | |
Zellen |
Kit | |
10 min | |
Weniger Risiken, weniger Abfall | |
50 reactions | |
Keine | |
RT-PCR, Real-Time PCR (qPCR) | |
50 Reaktionen | |
Reverse Transkription |
Zertifikate
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