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Beskrivning
RevertAid Premium Reverse Transcriptase was developed through in vitro evolution of M-MuLV RT. The enzyme possesses an RNA-dependent and DNA-dependent polymerase activity, but lacks Rnase H activity. The engineered enzyme features dramatically improved thermostability, robustness, and an increased synthesis rate compared to wild type M-MuLV RT.
The eliminated Rnase H activity enables the enzyme to produce very long RNA transcripts up to 20 kb. Due to its high thermostability, the enzyme maintains full activity during the entire reverse transcription reaction and generates high yields of cDNA. The reaction temperature can be increased up to 60°C for efficient transcription of RNA regions with a high secondary structure, or to improve specificity using gene-specific primers.
Die eliminierte RNase H-Aktivität erlaubt dem Enzym sehr lange RNA-Transkripte von bis zu 20 kb zu produzieren. Durch die hohe Thermostabilität erhält das Enzym seine volle Aktivität während der gesamten reversen Transkriptionsreaktion aufrecht und generiert hohe Ausbeuten an cDNA. Die Reaktionstemperatur kann für die effiziente Transkription von RNA-Regionen mit Sekundärstrukturen oder beim Gebrauch von genspezifischen Primern zur Verbesserung der Spezifität bis zu 60°C erhöht werden.
Vorteile
Thermostabil - 90% aktiv nach einer 60-minütigen Inkubation im Reaktionsmix bei 50°C
Aktiv bis zu 60°C
Hohe Ausbeuten von cDNA voller Länge bis zu 20 kb
Effizient - vollständige cDNA-Synthese in 30 Minuten
Baut modifizierte Nukleotide ein
Anwendungen
Erststrang cDNA-Synthese für RT-PCR und RT-qPCR
Reverse Transkription bei erhöhten Temperaturen zur Verminderung der Effekte von Sekundärstrukturen
cDNA-Synthese für die Klonierung und Expression
Erstellung von vollständigen cDNA-Bibliotheken
Herstellung von labeled cDNA-Sonden für Microarray
Packungsinhalt
RevertAid Premium Reverse Transcriptase enthält 5x RT-Puffer (250 mM Tris-HCl (pH 8,3 bei 25°C), 375 mM KCl, 15 mM MgCl2, 50 mM DTT).
Hersteller: EP0732 Art.-Nr.
Beschreibung: RevertAid Premium Reverse Transcriptase
Menge: 10 000 U (200 U/uL)
Specifikationer
Specifikationer
| Beschreibung | Größe x Konzentration: 10,000 U (200 U/µl) |
| Menge | 10,000 U |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Erstellung von Volllängen-cDNA-Bibliotheken; Echtzeit RT-PCR; RT-PCR; DNA-Markierung; Primer-Extension; Erststrang-cDNA-Synthese, RT-PCR, Real-Time PCR (qPCR), Markierung von Nukleinsäuren |
| Thermostabilität | 90 % aktiv nach Inkubation bei 50°C für 60 Minuten |
| Enthält | 1 ml 5x-RT-Puffer |
Dieses Produkt oder die Verwendung dieses Produkts unterliegt der internationalen Patentanmeldung WO2009/125006. Der Erwerb des Produkts umfasst eine nicht übertragbare, beschränkte Lizenz für den Gebrauch dieses Produkts für interne Forschungsanwendungen des Käufers. Für alle anderen kommerziellen Anwendungen dieses Produkts, einschließlich, aber nicht beschränkt auf den Gebrauch des Produkts für diagnostische Zwecke, den Wiederverkauf in der Originalform oder einer modifizierten Form oder den Gebrauch des Produkts für das Angebot kommerzieller Leistungen ist eine separate Lizenz von Fermentas erforderlich.
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