Thermo Scientific™ Rapid Equilibrium Dialysis (RED) Inserts and Plates
Pierce RED-Geräteeinsätze, 8 K MWCO; 250 Einsätze
Assays für die Plasmaproteinbindung bewerten Bindungsinteraktionen unter Konkurrenzeinfluss durch schnelle Gleichgewichtsdialyse (RED). RED-Geräte führen Tests zur Plasmaproteinbindung durch, ein entscheidender Schritt bei der Arzneimittelentwicklung. Dabei kommt Ausrüstung für das einfachste, schnellste und zuverlässigste System für die schnelle Gleichgewichtsdialyse zum Einsatz.
Pierce Competition Rapid Equilibrium Dialysis (RED)-Geräteeinsätze und -Grundplatten bestehen aus einem speziell entwickelten System zum Beurteilen von Bindungsinteraktionen mithilfe des Verfahrens zur schnellen Gleichgewichtsdialyse (RED). Sie wurden in enger Zusammenarbeit mit der pharmazeutischen Industrie entwickelt, um Assays zur Plasmaproteinbindung durchzuführen, die einen entscheidenden Schritt in der Arzneimittelentwicklung darstellen.
Das Competition RED-Gerät wurde in Zusammenarbeit mit pharmazeutischen Laboren entwickelt, um In-Vivo -Medikamenteninteraktionen präziser zu modellieren, indem Gleichgewichtsdialyse-Experimente in einem Multiplex-Format mit Konkurrenz für die Bindung zwischen verschiedenen Geweben durchgeführt werden können. Das RED Gerät ist eine Apparatur zur Durchführung von Experimenten zur Gleichgewichtsdialyse in einem für die Automatisierung geeigneten Format mit hohem Durchsatz. Es besteht aus Einwegeinsätzen und einer Grundplatte, die für die Fläche einer Standard-Mikrotiterplatte formatiert ist.
Das Competition RED Gerätesystem besteht aus Dialyseröhrcheneinsätzen für den Einmalgebrauch und einer Mehrweggrundplatte aus hochwertigem PTFE. Die Grundplatte ähnelt unserer normalen RED Geräteplatte, ist jedoch in Kammern verschiedener Größe (Wells) zum Positionieren von 2 bis 8 RED Geräteeinsätzen pro Well aufgeteilt. Das Format ermöglicht konkurrenzfähige Dialyseexperimente mit 2 bis 15 separaten Gewebe- oder Proteinflüssigkeitsproben.
Jeder Competition RED-Geräteeinsatz enthält entweder eine oder zwei separate Dialysekammern (jede Packung enthält eine Auswahl beider Ausführungen). Das Competition RED Device benötigt keine umfangreiche Montage oder spezielle Ausstattung. Jede Kammer/jedes Well ist einfach von oben zugänglich. Das Competition RED-Gerät erweitert die Leistung der Gleichgewichtsdialyse durch Erleichterung der Analyse von simultanen Medikamenteninteraktionen und Abtrennung bei mehreren Geweben.
Merkmale des Competition Rapid Equilibrium Dialysegeräts (RED): • Anwenderfreundlich—Für Einwegröhrchen ist kein Vornässen und keine Montage oder spezielle Ausrüstung erforderlich • Kurze Inkubationszeit—Der Aufbau ermöglicht ein hohes Verhältnis von Oberfläche zu Volumen zwischen Membran und Probe, sodass das Gleichgewicht zwischen 2 und 4 Stunden erreicht wird • Flexibles Format—Die Grundplatte enthält mehrere verschiedene Kammergrößen und ermöglicht so Untersuchungen zur Zerteilung kleiner Moleküle, bei denen sich 2 bis 16 Gewebe- oder Proteinproben ohne Abfall untersuchen lassen • Robust—Der unterteilte Aufbau eliminiert die Gefahr von Crosstalk oder Auslaugen • Reproduzierbar und präzise—Durchführen kontrollierter Experimente mit mehreren Geweben, um Screening-Ergebnisse zu erhalten, die eine hohe Vorhersehbarkeit für In-vivo-Studien mit Tiermodellen bieten • Validierte Qualität—Die Grundplatte besteht aus chemisch inertem, hochwertigem PTFE, das unspezifische Bindungen und Kontaminationsrisiken eliminiert. Jede Charge wird in einem Proteinbindungsassay funktional auf garantierte Leistung getestet
Anwendungen: • ADME-Tox Studien: In-Vitro -Screening von Medikamentenabtrennung zwischen Plasma und mehreren Geweben vor In-Vivo-Versuchen mit Tieren • hilft bei der Ermittlung der Rezepturen der Medikamentendosierung für In-Vivo -Studien • Studien zu Interaktionen zwischen Medikamenten • Bindung unter Konkurrenzeinfluss und Ermittlung der Dissoziationskonstante für kleine Moleküle gegenüber mehreren Zielen
Die Bestimmung des Ausmaßes, in dem ein Molekül zwischen Plasma und bestimmten Geweben im Körper abgetrennt wird, ist eine kritische Phase der Medikamentenentwicklung, da hierbei die Dosis, Wirksamkeit, Abbaugeschwindigkeit und das Potenzial für Medikamenteninteraktionen oder Gewebeschaden ermittelt wird. Obwohl für die abschließende Beurteilung dieser Variablen die Verarbeichung und Analyse an Tieren zwingend erforderlich sind, werden In-Vitro-Screening-Systeme mit hoher Geschwindigkeit und Vorhersagbarkeit für ADME-Tox-Studien als sehr wünschenswert angesehen.
Gleichgewichtsdialyse gehört zu den erfolgreichsten In-vitro-Screeningverfahren zur Beurteilung der Anforderungen an die Bindung und Dosierung von Arzneimitteln. Gleichgewichtsdialyse wird zum Beurteilen der ungebundenen Medikamentenfraktion in Plasma oder Medikamentenabtrennung zwischen roten Blutzellen und Plasma, Plasma und Lebermikrosomen oder Plasma und Gewebehomogenaten verwendet. Viele Gewebeabtrennungsstudien weisen jedoch darauf hin, dass bestimmte Medikamente bei individuellen Tests bedeutende Bindung an Geweben aufweisen, aber ganz andere Bindungspräferenzen haben, wenn sie in Konkurrenz zwischen mehreren Geweben gesetzt werden.
Merkmale der Geräteeinsätze für das RED-Gerät: Jeder Geräteeinsatz für den Einmalgebrauch besteht aus zwei nebeneinander liegenden Kammern, die durch einen auf minimale unspezifische Bindung getesteten vertikalen Zylinder einer Dialysemembran (in Ausführung 8 K oder 12 K MWCO) getrennt wird. Für dieses Format sind keine umfangreichen Montageschritte oder spezielle Ausstattung erforderlich. Jede Kammer oder jedes Well ist nach dem Einsetzen in die Basisplatte von der Oberseite des Einsatzes zugänglich. Zudem ermöglicht das hohe Oberflächen-Volumen-Verhältnis der Membrankammer eine schnelle Analyse, bei der mit hoher Reproduzierbarkeit und Präzision in vier Stunden ein Gleichgewicht erreicht werden kann. In vielen Fällen können Experimente in weniger als 100 min abgeschlossen werden.
• Einweg—Kein Vornässen, Montage oder Spezialausrüstung erforderlich • Kurze Inkubationszeit— Große Dialyseoberfläche beschleunigt das Gleichgewicht • 8 K MWCO-Membran—Idealer Molecular Weight Cut Off für Proteinbindungsstudien • 12 K MWCO-Membran auch für größere Arzneimittelmoleküle erhältlich • Membranzusammensetzung—Regenerierte Cellulose mit niedrigem Glyzeringehalt als Feuchthaltemittel
Merkmale der Grundplatten für RED-Geräte: Geräteeinsätze für RED-Geräte wurden für die Verwendung mit hochgradig dichten Mehrweggrundplatten aus PTFE bzw. Einweggrundplatten aus Polypropylen entwickelt. Jede RED Gerätegrundplatte enthält bis zu 48 RED Geräteeinsätze und verfügt über 96-Well-Platten mit 9 x 9 mm Abstand zwischen den Wells für Kompatibilität mit automatischen Flüssigkeitssystemen für das Liquid Handling. Zudem sind Grundplatten für RED-Geräte zur einfacheren Durchführung von Proteinbindungsanwendungen „vorgeladen“ erhältlich. Eine Vorbehandlung der Membraneinsätze ist nicht erforderlich. Bei Verwendung von radioaktiven Materialien kann die Einwegplatte einfach entsorgt werden, um Kontaminationen und anschließende Reinigung zu vermeiden.
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