Applied Biosystems™ PureQuant CD3+ T-Zellen-Assay

Beschreibung

Die Applied Biosystems PureQuant-Assays sind eine Reihe von Assays, die spezifische Immunzelltypen in einer gemischten Zellpopulation genau identifizieren und quantifizieren. Diese Assays basieren auf TaqMan qPCR und messen die genomische DNA-Methylierung an bestimmten Standorten, die als eindeutige Kennung dienen. Die Assays umfassen Standards und Kontrollen, und jede 96-Well-Platte kann bis zu sieben Testproben aufnehmen. Die Ergebnisse werden mit einem kostenlosen Analysewerkzeug als Prozentsatz des Zielzelltyps aus den gesamten Eingabezellen bereitgestellt.

Der PureQuant CD3+-Assay verwendet eine spezifische demethylierte Stelle im intragenen CD3G/CD3D-Bereich, um CD3+ T-Zellen positiv zu identifizieren.
Zu den Vorteilen gehören:

• Bewährte Leistung – Kerntechnologie wird seit mehr als ein Jahrzehnt zur Identifizierung und Quantifizierung von Immunzelltypen verwendet
• Einfach standardisiert – Die qPCR-Methode ermöglicht konsistente Ergebnisse über mehrere Anwender, Geräte und Standorte hinweg
• Erleichtert die Einreichung von Zulassungsanträgen – Auf Anfrage bereitgestellte Support-Datei für regulatorische Anforderungen; festgelegte Leistungsspezifikationen gemäß den ICHQ2(R1)-Richtlinien
• Planungsflexibilität – Der Assay kann mit frischen oder gefrorenen Zutaten durchgeführt werden Zellen/gDNA

Die Assays enthalten alle Reagenzien, Standards und Kontrollen, die für die Ausführung des Assays erforderlich sind. Zu den spezifischen Komponenten gehören:

• Kalibrator: Korrigiert Abweichungen bei der Effizienz der Bisulfitkonvertierung. Der Plasmid-basierte Kalibrator beherbergt die genomischen Zielregionen in äquimolaren Verhältnissen und enthält GAPDH. Wird einer Bisulfitkonvertierung unterzogen, gefolgt von einer Schätzung der Anzahl der Kopien über die qPCR-Standardkurve. Ermöglicht die Schätzung des Assay-spezifischen Bisulfit-Wirkungsfaktors: Das Verhältnis zwischen TPG/GAPDH-Kopienzahlen, gemessen vom selben Plasmid.
• Referenz: Prüft die Assay-Leistung. Besteht aus genomischer DNA, die aus menschlichem Blut gepoolter gesunder Spender gewonnen wird. Die Referenzwerte stellen den erwarteten Bereich des Zielzellentyps dar. CD8+-Zellen sind beispielsweise im Allgemeinen häufiger als Treg- oder Th17-Zellen.
• Standards: Ermitteln die unbekannte Anzahl der Kopien. Bestehen aus sechs Verdünnungen, die einen linearen dynamischen Bereich von 4 Logs (30 bis 31250 Kopien) abdecken. Absolute Anzahlen der Kopien können zuverlässig über die Steigung und den Achsabschnitt der jeweiligen Standardkurven bestimmt werden.

Dieses Produkt wird an einem Standort mit einem gemäß ISO 9001 zertifizierten Qualitätsmanagementsystem hergestellt.