Applied Biosystems™ PureQuant B-Zellen-Assay

Beschreibung

Die Applied Biosystems PureQuant-Assays sind eine Reihe von Assays, die spezifische Immunzelltypen in einer gemischten Zellpopulation genau identifizieren und quantifizieren. Diese Assays basieren auf TaqMan qPCR und messen die genomische DNA-Methylierung an bestimmten Standorten, die als eindeutige Kennung dienen. Die Assays umfassen Standards und Kontrollen, und jede 96-Well-Platte kann bis zu sieben Testproben aufnehmen. Die Ergebnisse werden als Prozentsatz des Zielzelltyps aus den gesamten Eingabezellen mit einem kostenlosen Analysewerkzeug bereitgestellt.

Der PureQuant B-Zell-Assay nutzt das LRP5-Gen als epigenetischen Marker für B-Zellen.

Die Vorteile:

• Bewährte Leistung – Kerntechnologie wird seit mehr als einem Jahrzehnt zur Identifizierung und Quantifizierung von Immunzelltypen verwendet
• Einfache Standardisierung – qPCR-Methode ermöglicht konsistente Ergebnisse über mehrere Benutzer, Geräte und Standorte hinweg
• Einfachere behördliche Einreichungen – Auf Anfrage bereitgestellte Support-Datei für regulatorische Anforderungen; festgelegte Leistungsspezifikationen gemäß den ICHQ2(R1)-Richtlinien
• Planungsflexibilität – Der Assay kann mit frischen oder gefrorenen Zutaten durchgeführt werden Zellen/gDNA

Die Assays enthalten alle Reagenzien, Standards und Kontrollen, die für die Ausführung des Assays erforderlich sind. Spezifische Komponenten sind beispielsweise:

• Kalibrator: Korrigiert Abweichungen bei der Effizienz der Bisulfitkonvertierung. Der auf Plasmid basierende Kalibrator beinhaltet die genomischen Zielregionen in äquimolaren Verhältnissen und umfasst GAPDH. Wird einer Bisulfitkonvertierung unterzogen, gefolgt von einer Schätzung der Anzahl der Kopien über die qPCR-Standardkurve. Ermöglicht die Schätzung des Assay-spezifischen Bisulfitwirkungsfaktors: Das Verhältnis zwischen TPG/GAPDH-Kopienzahlen, gemessen aus demselben Plasmid.
• Referenz: Prüft die Assay-Leistung. Besteht aus genomischer DNA, die aus menschlichem Blut gepoolter gesunder Spender gewonnen wird. Die Referenzwerte stellen den erwarteten Bereich des Zielzellentyps dar. CD8+-Zellen sind beispielsweise im Allgemeinen häufiger als Treg- oder Th17-Zellen.
• Standards: Ermitteln Sie die Anzahl unbekannter Kopien. Besteht aus sechs Verdünnungen, die einen linearen dynamischen Bereich von 4 Logs (30 bis 31.250 Kopien) abdecken. Absolute Kopienzahlen können zuverlässig über die Steigung und den Achsabschnitt der jeweiligen Standardkurven bestimmt werden.

Dieses Produkt wird an einem Standort mit einem ISO 9001-zertifizierten Qualitätsmanagementsystem hergestellt.