Invitrogen™ ProcartaPlex™ Human Inflammation Panel, 20plex

Das Human-Inflammation-20-Plex ProcartaPlex Panel ermöglicht die Untersuchung der Immunantwort durch die Analyse von 20 Protein-Targets in einem einzigen Well mithilfe der Luminex xMAP Technologie. Die Gesamtwirkung einer Inflammasomreaktion wird durch die Balance zwischen entzündungsfördernden und entzündungshemmenden Mediatoren bestimmt. Entzündungsfördernde Zytokine wie IL-1 beta, IL-6 und TNF-alpha sind für frühe Reaktionen verantwortlich und verstärken Entzündungsreaktionen, während entzündungshemmende Zytokine, zu denen IL-4, IL-10 und IL-13 gehören, den gegenteiligen Effekt haben, indem sie die Entzündungsreaktionen begrenzen. Ein unregulierter hyper-entzündlicher Zustand kann zu einem Zytokinsturm führen, auch Zytokin-Freisetzungssyndrom (CRS, Cytokin-Release-Syndrom) genannt. Aufgrund der zunehmenden Komplexität der entzündungsfördernden und entzündungshemmenden Zytokin- und Chemokin-Netzwerke ist es von entscheidender Bedeutung, diese nicht einzeln, sondern in relevanten Funktionsgruppen zu untersuchen.

ProcartaPlex vorkonfigurierte Panels werden umfassend auf die Kombinierbarkeit, Interferenz und Kreuzreaktivität von Analyten getestet, um ein Höchstmaß an Validierung und Präzision zu gewährleisten. Alle ProcartaPlex Panels werden mit den erforderlichen Reagenzien für den Assay geliefert.

ProcartaPlex Multiplex-Panels sind in verschiedenen Formaten für sechs Spezies erhältlich (Mensch, Maus, Ratte, nicht menschlicher Primat, Schwein und Hund).

Zielliste [Bead-Region]:
Zytokine: GM-CSF [44], IFN-alpha [48], IFN-gamma [43], IL-1 alpha [62], IL-1 beta [18], IL-4 [20], IL-6 [25], IL-8 [27], IL-10 [28], IL-12p70 [34], IL-13 [35], IL-17A (CTLA-8) [36], TNF-alpha [45]
Chemokine: IP-10 (CXCL10) [22], MCP-1 (CCL2) [51], MIP-1 Alpha (CCL3) [12], MIP-1 Beta (CCL4) [47]
Zelladhäsion und Entzündungsreaktion: ICAM-1 [73], CD62E (E-Selektin) [77], CD62P (P-Selektin) [55]

Informationen zu ProcartaPlex Assays für die Luminex Plattform
ProcartaPlex Immunoassays basieren auf den Prinzipien eines ELISA und nutzen zwei hochspezifische Antikörper, die an verschiedene Epitope eines Proteins gebunden sind, um alle Proteinziele gleichzeitig mit einem Luminex Gerät zu quantifizieren. ProcartaPlex Multiplex-Assays benötigen nur 25 μl Plasma oder Serum oder 50 μl Zellkulturüberstand und liefern analysierte Ergebnisse in nur vier Stunden.

Die Merkmale beinhalten:
• Reproduzierbare, zuverlässige Ergebnisse—als Panel nach dem höchsten Industriestandard validiert, einschließlich Proteinziel-Kombinierbarkeit und Kreuzreaktivitätstests
• Mehr Ergebnisse pro Probe—Messung mehrerer Protein-Targets gleichzeitig in einer einzigen 25 bis 50 μl Probe
• Hochgelobte Multiplexing-Plattform mit bewährter Luminex-Technologie für die Proteindetektion und -quantifizierung

ProcartaPlex-Assays nutzen die Luminex xMAP-Technologie (Multianalyten-Profiling) für die gleichzeitige Detektion und Quantifizierung von bis zu 80 Proteinzielen in einer einzigen 25 bis 50 μl-Probe—aus Plasma, Serum, Zellkulturüberständen und anderen Körperflüssigkeiten.

Die Luminex Beads im ProcartaPlex Assay sind intern mit präzisen Anteilen von roten und Infrarot-Fluorophoren gefärbt, um spektral einzigartige Signaturen zu erzeugen, die von den Luminex xMAP Detektionssystemen (z. B. Luminex 200, FLEXMAP 3D und MAGPIX) identifiziert werden können. Ähnlich wie bei einem Sandwich-ELISA verwendet der ProcartaPlex Assay zusammenpassende Antikörperpaare, um das zu untersuchende Protein zu identifizieren. In einem Multiplex-Assay wird jeder spektral einzigartige Bead mit spezifischen Antikörpern für ein einzelnes Zielprotein markiert, und gebundene Proteine werden mit biotinylierten Antikörpern und Streptavidin–R-Phycoerythrin (RPE) identifiziert. Die Konjugation von Protein-spezifischen Antikörpern an bestimmte Beads ermöglicht die Analyse mehrerer Ziele in einem einzelnen Well.

Der wichtigste Unterschied zwischen einem ProcartaPlex Assay und ELISA besteht darin, dass der Capture-Antikörper im ProcartaPlex Assay mit einem Bead konjugiert ist und nicht per Adsorption am Mikrotiterplatten-Well haftet, weshalb die ProcartaPlex Assay-Reagenzien frei in der Lösung schwimmen. Zum Nachweis verfügt das Luminex 200 Gerät beispielsweise über zwei Laser, einen zur Unterscheidung der spektralen Signatur jedes Beads und den zweiten zur Quantifizierung der RPE-Fluoreszenz, die proportional zur in der Probe vorhandenen Proteinmenge ist. Mit ProcartaPlex Multiplex-Assays können mehr Zielproteine mit deutlich weniger Proben in der gleichen Zeit profiliert werden, die für die Durchführung eines herkömmlichen Sandwich-ELISA benötigt wird.

ProcartaPlex Multiplex-Panels sind in verschiedenen Formaten für sechs Spezies erhältlich (Mensch, Maus, Ratte, nicht menschlicher Primat, Schwein und Hund).