Molecular Probes™ Premo™ Halide Sensor

Der Premo™ Halogenidsensor basiert auf einem gelb fluoreszierenden Protein (YFP), das empfindlich auf Halogenionen reagiert. Die Kombination des YFP-(Venus)-Biosensors mit effizienter und nicht-zytopathischer BacMam Zufuhr und Expression gibt Forschern ein hochempfindliches, robustes und anwenderfreundliches Werkzeug zum effizienten Screening von Halogenid-Ionenkanälen und Transporter-Modulatoren in den Zellmodellen ihrer Wahl. Es sind keine speziellen Geräte erforderlich, da der Sensor auf herkömmlichen HTS-Plattformen funktioniert. – Cl–Kanal–spezifisch — Messung des Flusses von Halogenidionen in spannungs- und Ligand-gesteuerten Chloridkanälen und -transportern – Schnell — Messung des Flusses von Chloriden im Hochdurchsatz-Modus, mir hervorragend reproduzierbaren Ergebnissen – Robust — verlässlich hohe Expression des hellen und schnell reifenden Venus-Sensors ergibt ein exzellentes Signalfenster – Praktisch in der Anwendung — Studieren Sie den Fluss von Chloiden in Ihrem Zellmodell durch wirkungsvolle und nicht-zytopatische Zufuhr des Premo™ Halogenidsensors mittels BacMam Technologie – Pharmakologisch relevant — bekannte Modulatoren zeigen dosisabhängiges Quenching, und die BacMam Zufuhr ermöglicht Assays in Primärzellen. Der Assay kombiniert den YFP Venus Halogenidsensor mit einem Austauschion für Chloride (Jodide). Nach der Simulation des Chloridkanals oder -transporters fließen Jodidionen dem Konzentrationsgradienten abwärts in die Zellen und quenchen nach der Bindung die Fluoreszenz. Die Stärke des Quenchings ist direkt proportional zum Ionenfluss (Aktivität in Chloridkanal oder -transporter). Aufgrund der hellen Venus-Fluoreszenz weist der Premo™ Halogenidsensor ein ausgezeichnetes Signalfenster auf. Wir haben den Nutzen und die Effizienz des Premo™ Halogenidsensors als robusten und echt “waschfreien” HTS-Chlorid-Assay demonstriert. Der Premo™ Halogenidsensor ist vorverpackt und kann sofort verwendet werden. Es sind alle Komponenten enthalten, die für die Zufuhr und Expression von Zellen erforderlich sind. Das Screening kann im vollständigen Medium und ohne Waschschritte durchgeführt werden. Um Pflege und Vorbereitung der Zellen vom Screening zu trennen, frieren Sie transduzierte Zellen einfach ein, und entnehmen Sie diese erst vier Stunden vor dem Screening. Es können sowohl stabile Zelllinien als auch humane Primärzellen gefroren und “Assay-fertig” vorbereitet werden.