Invitrogen™ Pre-miR™ hsa-miR-1 Positivkontrolle für miRNA-Vorläufer

Der Pre-miR™ hsa-miR-1-miRNA-Vorläufer ist für die Verwendung als Positivkontrolle in Experimenten mit Pre-miR-miRNA-Vorläufern vorgesehen. Dieser Vorläufer wurde als Positivkontrolle gewählt, da er bei der Abgabe in Zellen die Expression von Twinfilin-1 (PTK9) auf mRNA-Ebene (60–95 % Reduktion) effektiv nach unten reguliert. Die effektive Abgabe und Aktivität des Pre-miR hsa-miR-1-miRNA-Vorläufers kann mit einem TaqMan™ PTK9-Genexpressionsassay nachgewiesen werden (Assay-IDs: HS00702289_s1 [human], Mm01598980_g1 [Maus]).

Über Pre-miR miRNA-Vorläufermoleküle

Pre-miR™ miRNA Vorläufermoleküle sind kleine, chemisch modifizierte doppelsträngige RNA-Moleküle, die zur Nachahmung endogener reifer miRNAs entwickelt wurden. Diese gebrauchsfertigen miRNA-Mimics, die siRNAs stark ähneln, können durch dieselben Transfektions- oder Elektroporationsparameter wie bei siRNAs in Zellen eingesetzt werden. Das ermöglicht eine genaue Analyse der biologischen Wirkung von miRNA mithilfe von Gewinnfunktionsexperimenten (Abbildung 1). Positive und negative Kontrolle Pre-miR miRNA-Vorläufersubstanzen (oben aufgeführt) oder das Pre-miR™ Vorläuferkit können zur Optimierung der Transfektion von Pre-miR miRNA-Vorläufersubstanzen verwendet werden.

Pre-miR miRNA-Vorläufermoleküle wurden sorgfältig entworfen und modifiziert, um sicherzustellen, dass der richtige Strang, der die gewünschte reife miRNA darstellt, in den RNA-induzierten Silencing-ähnlichen Komplex aufgenommen wird, der für die miRNA-Aktivität verantwortlich ist (Abbildung 2). Im Gegensatz zu miRNA-Expressionsvektoren können diese synthetischen Moleküle aufgrund ihrer direkten Einbringung in die Zelle durch Transfektion oder Elektroporation in Dosis-Wirkungs-Studien eingesetzt werden. Dank ihrer geringen Größe lassen sie sich leichter transfizieren als Vektoren und können unter den gleichen Bedingungen geliefert werden wie siRNAs.