Thermo Scientific™ Pierce™ Recombinant Protein A

Gereinigtes (nicht konjugiertes) Thermo Scientific Pierce Recombinant Protein A ist nützlich als Grundlage für die Vorbereitung verschiedener Arten von Sonden oder Affinitätsmedien für den Nachweis oder die Reinigung von Kaninchen- und humanen Antikörpern, insbesondere IgG-Isotypen, in Immunassays und Antikörperreinigungsprotokollen.

Merkmale des rekombinanten Proteins A:

• Enthält vier Fc-bindende Domänen pro Protein
• Besser als Protein G für polyklonales IgG aus Kaninchen-, Schwein-, Hund- und Katzenserum
• Schlechter als Protein G für Maus-IgG1, humanes IgG3 und Ratten-, Ziegen- und Kuhantikörper

Protein A ist eine Zellwandkomponente, die von mehreren Staphylococcus-aureus-Stämmen erzeugt wird und aus einer einzelnen Polypeptidkette besteht und wenig oder kein Kohlenhydrat enthält. Rekombinantes Protein A wird in E. coli hergestellt und funktioniert im Wesentlichen genauso wie natives Protein A. Das Protein A-Molekül enthält vier Bindungsstellen mit hoher Affinität, die mit der Fc-Region aus IgG verschiedener Spezies, einschließlich Mensch und Kaninchen, interagieren können. Die optimale Bindung erfolgt bei pH 8,2, obwohl die Bindung auch bei neutralen oder physiologischen Bedingungen (pH 7,0 bis 7,6) wirksam ist.

Die Wechselwirkung zwischen Protein A und IgG ist nicht für alle Spezies äquivalent. Auch innerhalb einer Spezies interagiert Protein A mit einigen Subklassen von IgG und nicht mit anderen. Zum Beispiel binden humanes IgG1, IgG2 und IgG4 stark, während IgG3 nicht bindet. Es gibt auch viele Fälle, in denen monoklonale Antikörper nicht an Protein A binden, insbesondere die Mehrheit der Immunglobuline von Ratten und Maus-IgG1.

Merkmale des rekombinanten Proteins A:
• Quelle: E. coli
• Molekulargewicht: ∼44.600 (anscheinendes MW nach SDS-PAGE: 45.000)
• Form: Salzfreies Pulver
• A280 von 0,1 % Lösung: ∼0,165
• Isoelektrischer Punkt (pI): 4,7 bis 4,8

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