Thermo Scientific™ Pierce™ Gaussia-Firefly Luciferase Dual Assay Kit

Das Pierce Gaussia-Firefly Luciferase Dual Assay-Kit ist ein hochempfindlicher Assay für den gleichzeitigen Nachweis der Aktivität von Gaussia- und Red Firefly-Luziferase. Gaussia-Luziferase fungiert als experimenteller Reporter mit konstitutiv aktivem Red Firefly-Signal als Normalisierungskontrolle. Diese Kombination aus Reporter und Kontrolle ermöglicht die gleichzeitige Überwachung experimenteller Reporter- und Kontrollaktivitäten von Luziferase in einem Single-Read-Assay, ohne dass eine Zugabe von Substratreagenzien oder ein Quenching in zwei Schritten erforderlich ist. Die Assay-Arbeitslösung enthält Substrate für beide Luziferasen, und die Reaktionen erfolgen gleichzeitig mit der Flash-Kinetik. Die daraus resultierenden lumineszenten Signale sind mit Filtern spektral auflösbar. Mit einer einzigen Probe können Forscher die transkriptionelle Aktivität von regulatorischen Elementen, Signaltransduktionswegen und die Auswirkungen von Aktivatoren oder Inhibitoren testen.

Besondere Merkmale:

• Gleichzeitig – Gleichzeitiger, filterbasierter, wellenlängengetrennter Nachweis von zwei Luziferase-Aktivitäten

• Empfindlich – Messung der Aktivität der hellblauen Gaussia- und der Red Firefly-Luziferase in derselben Probe

• Schnell – Im Gegensatz zu herkömmlichen sequenziellen Dual-Assays ist kein Quenching-Schritt erforderlich

• Multiplex – Quantifizierung von zwei zellulären Aktivitäten in der- bzw. denselben Proben möglich

Enthält:

Zelllysepuffer, Reaktionspuffer und die Substrate Coelenterazin und D-Luziferin

Erforderlich:

Gaussia- und Red Firefly-Luziferase-Reporter; Filtersets in den Bereichen 425 bis 525 nm für Gaussia-Luc und 615 bis 675 nm für Red Firefly-Luc. Luminometer oder ein anderes Gerät zur Überwachung der Lumineszenz, z. B. Thermo Scientific Luminoskan Ascent und Varioskan Flash Mikrotiterplatten-Lesegeräte; Injektor für die Bewertung von mehr als 24 Wells auf einmal erforderlich.

Empfohlen für:

Gleichzeitige Untersuchung von zwei regulatorischen Elementen; gleichzeitige Überwachung von zwei Signalwegen; Möglichkeit der Untersuchung von mehr als einem Ziel pro Screening (z. B. Off-Target-Effekte)