Molecular Probes™ pHrodo™ AM Variety Pack

Messen und quantifizieren Sie den intrazellulären pH-Wert mithilfe von pHrodo Red AM und pHrodo Green AM Indikatorfarbstoffen. Diese Farbstoffe sind fluorogene Sonden, die die Zellmembran durchqueren und nach der Spaltung durch unspezifische Esterasen im intrazellulären Raum verbleiben.

Das pHrodo AM Variety Pack enthält jeweils ein Fläschchen mit pHrodo Red AM Indikatorfarbstoff bzw. mit pHrodo Green AM Indikatorfarbstoff. Die Reagenzien in den Fläschchen reichen zum Testen einer einzigen 96-Well-Platte. pHrodo Red AM und pHrodo Green AM intrazelluläre pH-Indikatoren sind fluorogene Sonden zur Messung des intrazellulären pH-Werts in lebenden Zellen. Die Sonden sind bei neutralem pH-Wert schwach fluoreszierend und fluoreszieren mit sinkendem pH-Wert deutlich stärker. Diese Reagenzien können zur Quantifizierung des pH-Werts zellulärer Zytosolen im Bereich von 4 bis 9 mit einem pKa von ∼6,5 verwendet werden und haben Anregungs-/Emissionsspektren von 560/585 nm (pHrodo Red) bzw. 509/533 nm (pHrodo Green).

Der pHrodo Red AM Farbstoff und der pHrodo Green Farbstoff sind photostabil und für Multiplex-Experimente geeignet. pHrodo Red kann problemlos mit einer Vielzahl von blauen, grünen und fern-roten Farbstoffen und Reportern wie GFP, Fuo-4, Calcein, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 Green, Mitosox Green und Mitotracker Deep Red überlagert werden. pHrodo Green kann problemlos mit einer Vielzahl von Reportern mit blauen, roten und weit roten Farbstoffen wie Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFPs und Mitotracker Deep Red überlagert werden. Die Farbstoffe pHrodo Red und pHrodo Green wurden mit AM-Estergruppen modifiziert, was zu einem nicht geladenen zellmembrangängigen Molekül führt. Einmal in der Zelle werden die lipophilen Blockierungsgruppen durch unspezifische Esterasen gespalten, was zu einer Verbindung führt, die im intrazellulären Raum erhalten bleibt. Die Fluoreszenzintensität der Sonde ist dann ein Indikator für den intrazellulären pH-Wert. Die anschließende Verwendung des intrazellulären pH-Kalibrierpuffer-Kits (Best.- Nr. P35379) ermöglicht die Quantifizierung dieses intrazellulären pH-Werts.

Die intrazellulären pH-Indikatoren pHrodo Red AM und pHrodo Green AM sind mit zahlreichen Plattformen kompatibel, z. B. mit herkömmlicher Fluoreszenzmikroskopie, High-Content-Screening (HCS), Durchflusszytometrie und Mikrotiterplatten-basierter Fluorimetrie sowie mit High-Throughput-Screening (HTS). Diese Reagenzien sind auch kompatibel mit Weitfeld- und Konfokal-Fluoreszenzmikroskopie, Durchflusszytometrie, Fluoreszenzplatten-Lesegeräten und High-Content-Instrumenten.