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OPTIZYME™ SacI, Fisher BioReagents™

Marke:  Fisher Bioreagents BP8016-1

Additional Details : Gewicht : 0.01000kg

Artikelnummer. 11914782

  • 427.00 CHF / 1 Stück
Verfügbar ab: 16-04-2024
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Beschreibung

Beschreibung

5'...G A G C T^C...3'
3'...C^T C G A G...5'

Im Lieferumfang enthalten: 10X OPTIZYME ECL136II, Sacl-Puffer
Bedingungen für 100 %-Aktivität:

  • 1X OPTIZYME Puffer ECL136II, SACI: 10 Mm Bis-Tris Propan-HCl (pH 6.5 bei 37 °C),10 mM MgCl2 und 0.1 mg/ml BSA
  • Bei 37 °C inkubieren
Enzymaktivität in OPTIZYME Puffern:
  • Puffer 1: 50 Bis 100 %
  • Puffer 2: 20 Bis 50 %
  • Puffer 3: 0 Bis 20 %
  • Puffer 4: 50 Bis 100 %
  • Puffer 5: 0 Bis 20 %
Lagerungspuffer:
  • 10mM Tris-HCl (pH 7.4 bei 25 °C),100 mM KCl,1 mM DTT,1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
  • Ligation und erneutes Schneiden:
  • Mehr als 95 % der DNA-Fragmente können mit 50 SACI nach einer 50-fach-Überverdauung Ligiert und erneut geschnitten werden.
  • Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
  • Für die vollständige Verdauung von 1 μg Agarose-eingebetteter Lambda-DNA innerhalb von 16 Stunden ist ein Minimum an 5 Einheiten von Sacl erforderlich.
  • Hinweise:
    • Sacl ist empfindlich für Cytosin-Methylierung bei GAGmCTC, aber nicht bei GAGCTmC und unempfindlich für Adenin-Methylierung bei GmAGCTC/. AluI-Methyltransferase (AGmCT) kann eingesetzt werden, um SacI zu blockieren.
    • Für den vollständigen Verdau superspiralisierter Plasmid-DNA kann die bis zu 5-fache Menge an SacI gegenüber linearer DNA benötigt werden.
    • Sacl wird von gängigen klinischen Gerinnungshemmern gehemmt, die in einigen Proben von gerinnungsgehemmtem peripheren Blut und Knochenmark vorkommen. Spiegel von EDTA und ACD (Acid-Citrate-Dextrose) in Standardproben haben eine Hemmung von SacI gezeigt. Zur Hemmung von Sacl ist das Dreifache der normalen Heparin-Konzentration erforderlich.
    Kompatible Enden: ALW21I, Eco24I, SduI
    Methylierungseffekte:
    Dam: Nie überlappend – keine Auswirkung
    Dcm: Nie überlappend – keine Auswirkung
    CpG: Kann überlappen – keine Auswirkung
    • 5'...m5C GAGCTm5C G...3'
  • 3'... Gm5CTCGA Gm5C...5'
  • (Keine Auswirkung auf das Schneiden)
  • EcoKI: Nie überlappend – keine Auswirkung
  • EcoBI: Kann überlappen – keine Auswirkung
    • 5'...TGm6AGCTC(N)4 TGCT...3'
  • 3'...AC TCGAG(N)4 m6ACGA...5'
  • (Keine Auswirkung auf das Schneiden)
  • Spezifikation

    Spezifikation

    10 U/μl
    37 °C
    >95 % der DNA-Fragmente können nach einer 50-fachen Überverdauung mit Sacl ligiert und erneut geschnitten werden
    2000 U
    SacI
    10X OPTIZYME™ ECL136II, Sacl-Puffer
    7,4
    10 mM Tris HCl (pH 7,4 bei 25 °C), 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,2 mg/ml BSA, 50 % Glycerin
    GAGCT.C
    Flüssig
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