OPTIZYME™ Alol, Fisher BioReagents™

5'...^ ₇(N) G A A C (N)₆ T C C (N)_12-13^...3'
3'...^_12-13(N) C T T G (N)₆ A G G (N)₇ ^...5'

Im Lieferumfang enthalten: 10x OPTIZYME Puffer 5
Bedingungen für 100 %-Aktivität:

• 1X OPTIZYME Puffer 5: 10 mM Tris-HCl (pH 8.5 bei 37° C), 10 mM MgCl₂, 100 mM KCl und 0.1 mg/ml BSA
• Bei 30 °C inkubieren

• Puffer 1: 0 Bis 20 %
• Puffer 2: 0 Bis 20 %
• Puffer 3: 0 Bis 20 %
• Puffer 4: 20 Bis 50 %
• Puffer 5: 100 %

• 10Mm Tris-HCl (pH 7.4 bei 25 °C),100 mM KCl,1 mM DTT,1 mM EDTA,0.2 mg/ml BSA und50 % (v/v) Glycerin

• Inkubation bei 37 °C führt zu einer 20%igen Aktivität.
• AloI erzeugt Doppelstrangschnitte auf beiden Seiten der unterbrochenen Erkennungsstelle. Sein einzigartiges Merkmal ist ein degenerierter Spaltort an der 3'-Seite der Erkennungssequenz (12 oder 13 Nukleotide weit entfernt).
• Die Anwesenheit von S-Adenosylmethionin im Reaktionsgemisch führt zu unvollständiger Spaltung mit AloI.
• Ein mehr als 10-facher Überverdau mit AloI kann zu Star-Aktivität führen.
• AloI kann mit der gespaltenen DNA verbunden bleiben. Dies kann eine DNA-Bandenverlagerung während der Elektrophorese zur Folge haben. Verwenden Sie zur Vermeidung atypischer DNA-Bandenmuster den 6-fachen DNA Ladepuffer und die SDS-Lösung für die Probenvorbereitung oder erhitzen Sie die verdaute DNA in Gegenwart von SDS vor der Elektrophorese.

• 5'...GAAC(N)₄Gm6A TCC...3'

• 5'...GAAC(N)₆TCm5CW GG...3'

• 5'...m5C GAAC(N)₆TCC...3'

• 5'...GAAC(N)₆TCm5C G...3'

• 5'...GAAm5C G(N)₅TCC...3'