Macherey-Nagel™ NucleoSpin™ RNA/DNA-Pufferset

Mit dem NucleoSpin™ RNA/DNA-Pufferset (in Kombination mit dem NucleoSpin™ RNA II oder NucleoSpin™ RNA Pflanzen-Kit) wurde eine Methodik entwickelt, die die Isolierung von RNA und DNA aus ungeteilten Proben in einem einzigen Arbeitsgang mit Hilfe einer Silika-basierten Spin-Säule ermöglicht. DNA und RNA werden sequentiell aus der Säule mit Hilfe eines niedrigen Salzpuffers und Wasser eluiert, wodurch die sofortige Verwendung von DNA und RNA für häufige Downstream-Prozesse erleichtert wird. Bei einer steigenden Anzahl von Anwendungen ist die selektive Isolierung von RNA und DNA aus nur einmal vorhandenen, wertvollen Proben eine Forderung. Nach dem Aufteilen einer Probe werden üblicherweise zwei unabhängige Präparationen – eine für RNA und eine für DNA – vorgenommen. Bei bestimmte Proben ist eine Aufteilung jedoch unvorteilhaft, wenn nicht gar unmöglich, z. B. bei Biopsieproben oder bei einzelnen Individuen kleiner Organismen (z. B. Insekten und Würmer). Es stehen nur wenige Methoden zur Isolierung von RNA und DNA aus nicht aufgeteilten Proben zur Verfügung, nach denen RNA und DNA getrennt und sofort für die Verwendung in gängigen Downstream-Prozessen zur Verfügung stehen. Inhalt des Kits: Das Pufferset ist ausreichend für 100 DNA-Isolierungen in Kombination mit NucleoSpin™ RNA II oder NucleoSpin™ RNA Pflanzen-Kits, NucleoSpin™ RNA/Protein-Kits.

• Format: Pufferset für die Elution von DNA in Kombination mit RNA-Präparationen, zur Verwendung in Kombination mit NucleoSpin RNA-Kits
• Probenmaterial: Siehe NucleoSpin RNA II, NucleoSpin RNA XS, NucleoSpin RNA Pflanze, NucleoSpin RNA Protein
• DNA-Größe: 200 bp bis > 30 kb
• Typische DNA-Ausbeute: 5 μg aus 10 g⁶ HeLa-Zellen, 16 μg aus 30 mg Schweineleber, 5 μg aus 100 mg Maisblatt
• DNA-Elutionsvolumen: 100 μ l
  Typische Anwendungen:
  Bei Biopsiematerial: RNA zur Expressionsanalyse; DNA zur Mutationsanalyse, z. B. auf Krebsgene. Beim Gemeinen Holzbock (Ixodes ricinus): RNA zur Analyse auf RNA-Viren (z. B. TBE-V, FSME-Virus, infektiöser Auslöser der Meningoencephalitis); DNA zur Analyse auf Keime (z. B. Borrelia burgdorferi, infektiöser Auslöser der Lyme-Krankheit). Bei transgenen Pflanzen oder Tieren: RNA zur die Expressionsanalyse des transformierten Gens und/oder anderer Gene; DNA zur Analyse von Integrationsort, Integrationsanzahl und Sequenzbestätigung des transformierten Gens. Bei transfizierten Kulturzellen: RNA zur Expressionsanalyse des Transgens oder anderer Gene von Interesse; DNA zur Analyse des Methylierungsstatus des Transgens und anderer interessierter Gene.