Macherey-Nagel™ NucleoBond™ AX 10000, Giga-Säulen für Plasmid-DNA in Transfektionsqualität

NucleoBond™ Plasmid-Reinigungskits beinhalten NucleoBond™ Die AX-Technologie ist ein auf Silica basierender Anionenaustauscher, der für die routinemäßige Trennung verschiedener Nukleinsäureklassen entwickelt wurde und eine überlegene biologische Aktivität der gereinigten Nukleinsäuren sowie hohe Massenausbeuten durch Minimierung unspezifischer Adsorptionseffekte ermöglicht. Aus der Kulturbouillon geerntete Bakterien werden mit einem modifizierten alkalischen/SDS-Verfahren lysiert. Sowohl chromosomale als auch Plasmid-DNA werden unter diesen alkalischen Bedingungen denaturiert. Kaliumacetat wird dann dem denaturierten Lysat zugesetzt, wodurch ein Fällungsmittel entsteht, das chromosomale DNA und andere zelluläre Verbindungen enthält, wodurch das Lysat neutralisiert wird. Plasmid-DNA, die in Lösung bleibt, kann zu ihrer nativen Supercoil-Struktur zurückkehren. Nach dem Ausgleich der entsprechenden NucleoBond™ Auf die AX-Säule wird das geklärte Lysat aufgetragen und die Plasmid-DNA bindet an das Anionenaustauscherharz. Nach anschließenden Waschschritten wird die gereinigte Plasmid-DNA in einem hochsalzigen Puffer eluiert und mit Isopropanol ausgefällt. Schließlich wird die Plasmid-DNA zur weiteren Verwendung im TE-Puffer rekonstituiert. Alternativ dazu NucleoBond™ Finalizer kann zur Konzentration und Entsalzung von eluierter Plasmid-DNA verwendet werden. NucleoBond™ Gefaltete Filter (im Lieferumfang der Kits Midi (PC 100), Maxi (PC 500), Mega (PC 2000) und Giga (PC 10000) enthalten) eliminieren den Zentrifugationsschritt nach der alkalischen Lyse. Die Filter reduzieren den manuellen Aufwand und eliminieren den bei anderen Filtersystemen üblichen Plastikmüll. In etwa 2 Minuten (Midi) bzw. 10 Minuten (Maxi) unbeaufsichtigtem Betrieb wird eine vollständige Entfernung von SDS und Zelltrümmern aus den Plasmidproben erreicht. NucleoBond™ Gefaltete Filter bewirken kein Scheren großer DNA-Konstrukte wie PACs oder BACs. Kit-Typen und ihre Komponenten: NucleoBond™ Mini (PC 20) - NucleoBond™ AX 20 Säulen, Puffer, RNase A. NucleoBond™ Midi (PC 100) - NucleoBond™ AX 100-Säulen, Puffer, gefaltete RNase A-Filter. NucleoBond™ Maxi (PC 500) - NucleoBond™ AX 500 Säulen, Puffer, RNase A, gefaltete Filter XL. NucleoBond™ Mega (PC 2000) - NucleoBond™ AX 2000 Säulen, Puffer, RNase A, gefaltete Filter XL. NucleoBond™ Giga (PC 10.000) - NucleoBond™ AX 10.000 Säulen, Puffer, RNase A, gefaltete Filter. Weitere Informationen zu diesem Produkt erhalten Sie beim Kundendienst.

• NucleoBond™ Gefaltete Filter eliminieren den Zentrifugationsschritt und ermöglichen so eine einfache, schnelle und bequeme Klärung von Bakterienlysaten.
• Die Säulen sind schwerkraftflussgesteuert, wodurch mehrere Proben gleichzeitig aufgereinigt werden können.
• Arbeitsbereich: Nanogramm bis Milligramm DNA
• Die Gewinnung von Plasmid-DNA ist > 90 %
• Transfektionsfähige DNA
• Hohe chargenübergreifende Reproduzierbarkeit
• Keine Verwendung organischer Lösungsmittel
• Alkoholfällung von DNA/RNA Reinigung von Plasmid-DNA mit hoher und niedriger Kopienzahl aus E. coli , die für Transfektion, Sequenzierung und Klonierung geeignet ist.