Invitrogen™ NA-Fluor™ Influenza Neuraminidase Assay Kit

• Effizientes Design: Neuraminidase-Assay in einem kompletten Kit
• Optimierte Formeln: Assayreagenzien wurden für maximale Anzahl Leistung basierend auf NISN-Protokollen optimiert
• Robuste Anwendung: Funktionelle Erkennung von NI-resistenten Viren in gemischten viralen Populationen
• Anwenderfreundlich und flexibles Screening: stabiles Fluoreszenzsignal ermöglicht die Verarbeitung im Batch-Modus oder mit hohem Durchsatz

Spezifikationen

• Farbe: Blau
• Nachweisverfahren. Fluoreszent
• Filtertyp: Emission 440 bis 460, Anregung 350 bis 365
• Zur Verwendung mit (Geräte): Fluorometer
• Form: Gefriergetrocknet
• Format: 96-Well-Mikrotiterplatte
• Mit hohem Durchsatz kompatibel: Hochdurchsatzkompatibel

Neuraminidase-Assay in einem kompletten Kit
Das NA-Fluor Influenza Neuraminidase-Assay-Kit enthält umfassende Protokolle für die Titierung viraler Isolate auf der Grundlage der Neuraminidase-Aktivität und für die Durchführung von Neuraminidase-Enzym-Inhibitionsassays. Der Assay kann auch zur Überwachung der Neuraminidase-Enzymaktivität aus nicht-viralen oder bakteriellen Quellen verwendet werden. Das NA-Fluor Kit enthält Reagenzien für zehn 96-Well-Mikrotiterplatten, die für insgesamt 960 Assay-Wells ausreichen, und enthält die folgenden Komponenten: Fluoreszierendes MUNANA-Neuraminidase-Substrat, Assaypuffer und Stopplösung zur Verbesserung und Stabilisierung des Signals. Der Assay wird in schwarzen Standard-Mikrotiterplatten (Mikrotiterplatten nicht im Kit enthalten) durchgeführt und auf Standard-Fluorometern gelesen.

Neuraminidase-Assay im Vergleich zu NISN-Protokollen
Die Rezepturen der NA-Fluor Assay-Reagenzien sind so optimiert, dass sie mit mehreren etablierten MUNANA-basierten Assay-Protokollen vergleichbar sind, wie z. B.:

• Die MUNANA-Substratkonzentration, die Assaypufferformulierung und die Assaybedingungen entsprechen den NISN IC-50-Bestimmungsprotokollen
• Die mit dem NA-Fluor-Assay generierten Daten entsprechen den mit etablierten MUNANA-basierten Protokollen generierten Daten

Diese Schlüsselparameter ermöglichen es Prüfern, während der aktuellen NI-Resistenz-Surveillance-Screens mit dem NA-Fluor™ Assay erfassten Daten mit Daten zu vergleichen, die mit den früheren MUNANA-Assay-Protokollen erfasst wurden

Nachweis von NI-resistenten Viren in gemischten viralen Populationen
Die große Verschiebung der IC-50-Werte zwischen empfindlichen und oseltamivir-resistenten Viren mit dem NA-Fluor Assay ermöglicht den Nachweis von mutierten Viren in gemischten viralen Proben. Diese Funktion ist entscheidend für die Identifizierung resistenter Viren in klinischen Isolaten, die gemischte Populationen von resistenten und empfindlichen Viren während der NI-Empfindlichkeitsüberwachung aufweisen.

Flexibilität für das Screening der Neuraminidase-Aktivität
Der NA-Fluor Assay bietet ein einfaches, flexibles Format für das Screening von einigen wenigen bis mehreren hundert viralen Isolaten bzw. das Screening von Tausenden von Verbindungen während der Erkennung von Zielen mit hohem Durchsatz mit hochwertigen Daten bei hoher Zuverlässigkeit. Mit seiner überlegenen Leistung hat der Assay einen Z'-Faktor von 0,78 bis 0,8 demonstriert, was ihn sehr gut für den Einsatz im Hochdurchsatz-Screening geeignet macht. Das fluoreszierende Reaktionsprodukt bleibt nach Abschluss des Assays bei Raumtemperatur stundenlang stabil und ermöglicht so eine flexible Lesezeit und vergleichbare Daten von der ersten Platte bis zur letzten. Das Assay-Signal bleibt nahezu konstant, und die IC-50-Werte sind identisch mit den Daten, die bei Raumtemperatur bis zu 4 Stunden und bis zu 4 Tage bei 4 °C nach Beendigung des Assays gesammelt wurden. Der NA-Fluor Assay wurde als Endpunkt-Assay optimiert, der nach der Vorinkubation von NI eine Stunde lang bei 37 °C läuft. Die Geschwindigkeit der MUNANA-Substratumsätze bleibt jedoch mit viraler Neuraminidase mehr als 2 Stunden lang linear, sodass der Assay in nur 20 Minuten durchgeführt werden kann, um Zeit zu sparen oder in bis zu 2 Stunden, um die Signalausgabe zu erhöhen. Für Ermittler, die ihre eigene Assay-Entwicklung durchführen oder die Substratfluktuationsraten in Gegenwart von Inhibitoren überwachen möchten, kann der Assay auch in Echtzeit ohne Zugabe von Stopplösung durchgeführt werden.