Invitrogen™ NucBlue™ Fixed Cell ReadyProbes™ Reagenz (DAPI)

DAPI ist eine häufig verwendete nukleäre Gegenfärbung für fixierte Zellen, die bei Bindung an die DNA blau fluoresziert.

• In der Fluoreszenzmikroskopie wird DAPI durch UV-Licht erregt und durch einen blauen bzw. blaugrünen Filter detektiert
• DAPI wird typischerweise als feste oder hochkonzentrierte Lösung geliefert, die vor der Verwendung gewogen und mehrere tausend Mal verdünnt werden muss. Die empfohlene Lagerung erfolgt in der Regel im Tiefkühlschrank oder Kühlschrank
• Diese Version ist gebrauchsfertig und kann neben einem Mikroskop oder einer Arbeitsstation gelagert werden
• Die spektralen Eigenschaften von DAPI (4′,6-diamidino-2-phenylindol), seine Selektivität für dsDNA und seine stärkere Fluoreszenz bei Bindung an DNA gebunden macht es zu einem ausgezeichneten fluoreszierenden Gegenfärbemittel für Zellkerne und ideal für die Verwendung mit grünen (Alexa Fluor™ 488, FITC, GFP) und roten (Alexa Fluor 594, Rhodamin, Texas Red™, mCherry, mKate-2) Fluorophoren in mehrfarbigen Experimenten
• Aufgrund seiner hohen Affinität zur DNA wird es auch häufig zum Zählen von Zellen, zur Messung der Apoptose, zum Sortieren von Zellen nach DNA-Gehalt und als Hilfsmittel zur nukleären Segmentierung in der bildgebenden High-Content-Analyse eingesetzt
• In den meisten Fällen sorgen 2 Tropfen/ml und 15 bis 30 Minuten Inkubationszeit für eine helle Zellkernfärbung; bei einigen Zellarten, Bedingungen und Anwendungsfällen kann jedoch eine Optimierung erforderlich sein
• Angeregt durch UV-Licht bei 360 nm bei Bindung an DNA, mit einem Emissionsmaximum bei 460 nm
• Wird durch den blauen/zyanblauen Filter erkannt
• Als bevorzugte blaue Kernfärbung bei bildgebenden Experimenten mit fixierten Zellen und gut geeignet für die Verwendung mit Antikörper-basierten Anwendungen

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