Invitrogen™ Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 594 HCS Assay

Schonende Fixierung und Permeabilisierung durch Lösungsmittel, die für das Click-iT EdU-Nachweisreagenz ausreichend ist, um Zugang zur DNA zu erhalten. Der Click-iT EdU Alexa Fluor 594 HCS-Assay ist eine hervorragende Alternative zu herkömmlichen Proliferationsassays und optimiert für High-Content-Bildgebungsanwendungen. Bei diesem Assay wird das geänderte Thymidin-Analogon EdU effizient in neu synthetisierte DNA integriert und mit einem hellen, lichtbeständigen Alexa Fluor Farbstoff bei einer raschen, höchst spezifischen Click-Reaktion fluoreszenzmarkiert. Diese Fluoreszenzmarkierung proliferierender Zellen ist präzise und kompatibel mit Antikörper-Methoden aufgrund des schonenden Click-Protokolls. Die genauesten Proliferations-/Detektionsverfahren basieren auf der Einbindung und Messung von Nukleosid-Analoga in neu synthetisierter DNA mit Bromdesoxyuridin (BrdU), einem häufig verwendeten Analog. BrdU-markierte DNA wird mit Anti-BrdU-Antikörpern nach der DNA-Denaturierung durch Eingriffe wie HCL, Hitze oder Enzyme zur Freilegung der BrdU-Moleküle quantifiziert. Dieser Schritt ist jedoch zeitaufwändig und dauerhaft kaum auszuführen. Diese Eingriffe können sich zudem negativ auf die Probenintegrität und -qualität auswirken, wodurch rinr Co-Färbung mit anderen Antikörpern zur Herausforderung wird.

• Einfach: funktioniert beim ersten Mal, jedes Mal und in kürzerer Zeit
• Effizient: keine Denaturierungsschritte oder eingreifende Verfahren erforderlich
• Inhaltsreiche Ergebnisse: bessere Erhaltung der Zellmorphologie, Antigenstruktur und DNA-Integrität
• Konsistenz: hängt für eine Erkennung nicht von variablen Antikörper-Chargen ab
• Weniger gefährlich

Hervorragende Proliferationsmethodik
Der Click-iT EdU Alexa Fluor 594 HCS Assay ist eine hervorragende Alternative zu BrdU-Assays für Messungen der Zellproliferation. EdU (5-Ethinyl-2'-Desoxyuridin) ist ein Nukleosid-Analogon von Thymidin und wird während der aktiven DNA-Synthese in DNA eingebunden. Mit Click-iT EdU sind eine schonende Fixierung und Lösungsmittelpermeabilisierung für das kleinmolekülige Click-iT EdU-Detektionsreagenz ausreichend, um Zugang zur DNA zu erhalten. Das Click-iT EdU HCS Assay ist deshalb nicht nur einfach anzuwenden, sondern in der Zellzyklusanalyse und anderen intra- oder extrazellulären Analysen präziser und kompatibel für höchst aussagekräftige Ergebnisse.

Der Click-iT Assay kann nach Verabreichung von EDU durch Zufuhr oder Injektion an Zellen in Kultur oder in vivo verwendet werden.
Der Click-iT Assay kann mit BrdU in Doppelpulsexperimenten verwendet werden, indem der anti-BrdU (MoBu-1-Klon)-Antikörper verwendet wird, der nicht mit EDU kreuzreagiert.
Die Click-iT Technologie ist kompatibel mit immunhistochemischen, immunzytochemischen und fluoreszierenden Farbstoffen, die fixierungstolerant sind oder für die Markierung von festen Zellen entwickelt wurden.

Zellanalyse, Zellzyklus, Zellproliferation, Zellviabilität, Proliferation und Funktion, Zelluläre Bildgebung, DNA-Replikation und -Reparatur, High-Content-Screening (HCS)