Das Click-iT EdU Alexa Fluor 555 Bildgebungskit ist eine hervorragende Alternative zu herkömmlichen Proliferationsassays und ist optimiert für Fluoreszenzmikroskopieanwendungen. Bei diesem Assay wird das geänderte Thymidin-Analogon EdU effizient in neu synthetisierte DNA integriert und mit einem hellen, lichtbeständigen Alexa Fluor Farbstoff bei einer raschen, höchst spezifischen Click-Reaktion fluoreszenzmarkiert. Diese Fluoreszenzmarkierung proliferierender Zellen ist präzise und kompatibel mit Antikörper-Methoden aufgrund des schonenden Click-Protokolls. Die genauesten Proliferations-/Detektionsverfahren basieren auf der Einbindung und Messung von Nukleosid-Analoga in neu synthetisierter DNA mit Bromdesoxyuridin (BrdU), einem häufig verwendeten Analog. BrdU-markierte DNA wird mit Anti-BrdU-Antikörpern nach der DNA-Denaturierung durch Eingriffe wie HCL, Hitze oder Enzyme zur Freilegung der BrdU-Moleküle quantifiziert. Dieser Schritt ist jedoch zeitaufwändig und dauerhaft kaum auszuführen. Diese Eingriffe können sich zudem negativ auf die Probenintegrität und -qualität auswirken, wodurch rinr Co-Färbung mit anderen Antikörpern zur Herausforderung wird.
Einfach: funktioniert beim ersten Mal, jedes Mal und in kürzerer Zeit
Effizient: keine Denaturierungsschritte oder eingreifende Verfahren erforderlich
Inhaltsreiche Ergebnisse: bessere Erhaltung der Zellmorphologie, Antigenstruktur und DNA-Integrität
Konsistenz: hängt für eine Erkennung nicht von variablen Antikörper-Chargen ab
Weniger gefährlich
Hervorragende Proliferationsmethodik Das Click-iT EdU Alexa Fluor 555 Bildgebungs-Kit ist eine hervorragende Alternative zu BrdU-Assays für Messungen der Zellproliferation. EdU (5-Ethinyl-2'-Desoxyuridin) ist ein Nukleosid-Analogon von Thymidin und wird während der aktiven DNA-Synthese in DNA eingebunden. Mit Click-iT EdU sind eine schonende Fixierung und Lösungsmittelpermeabilisierung für das kleinmolekülige Click-iT EdU-Detektionsreagenz ausreichend, um Zugang zur DNA zu erhalten. Das Click-iT EdU-Bildgebungs-Kit ist deshalb nicht nur einfach anzuwenden, sondern in der Zellzyklusanalyse und anderen intra- oder extrazellulären Analysen präziser und kompatibel für höchst aussagekräftige Ergebnisse.
Der Click-iT Assay kann nach Verabreichung von EdU durch Zufuhr oder Injektion an Zellen in Kultur oder in vivo verwendet werden. Der Click-iT Assay kann mit BrdU in Doppelpulsexperimenten verwendet werden, indem der anti-BrdU (MoBu-1-Klon)-Antikörper verwendet wird, der nicht mit EdU kreuzreagiert. Die Click-iT Technologie ist kompatibel mit immunhistochemischen, immunzytochemischen und fluoreszierenden Farbstoffen, die fixierungstolerant sind oder für die Markierung von festen Zellen entwickelt wurden.
Zellanalyse, Zellzyklus, Zellproliferation, Zellproliferation mit Click-Chemie, Zellviabilität, Proliferation und Funktion, Zelluläre Bildgebung, Click-Chemie, DNA-Replikation und -Reparatur, Immunzytochemie (ICC), Immunfluoreszenz (IF), Markierungschemie
Jedes Kit enthält genug Material für 50 bis 250 Reaktionen, je nach Reaktionsvolumen (typischerweise zwischen 0,1 und 0,5 ml). Bei 2–6 °C getrocknet und vor Licht geschützt aufbewahren.
