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Invitrogen™ MessageAmp™ II aRNA Amplification Kit
Beschreibung
Includes
60 μl T7-Oligo(dT)-Primer; 22 μl ArrayScript™ reverse Transkriptase; 22 μl RNase-Inhibitor; 42 μl 10x Erststrang-Puffer; 170 μl dNTP-Gemisch; 210 μl 10x Zweitstrang-Puffer; 42 μl DNA-Polymerase; 22 μl RNase H; 84 μl T7-Enzymgemisch; 84 μl T7 10x Reaktionspuffer; 84 μl je T7 ATP, CTP, GTP und UTP; 40 μl Zweitzyklus-Primer; 10 μl 1 mg/ml-Kontroll-RNA; 1,75 ml nukleasefreies Wasser; 30 ml Waschpuffer; 7 ml cDNA-Bindungspuffer; 9 ml aRNA-Bindungspuffer; 20 aRNA Filterkassetten; 40 aRNAC-Entnahmeröhrchen, 20 cDNA-Filterkassetten und -röhrchen; 20 cDNA-Elutionsröhrchen; 10 ml nukleasefreies Wasser
Überblick über das SystemDas Expressionsprofiling mit Gen-Arrays ist mittlerweile die am weitesten verbreitete Methode zur Beurteilung der Genexpression in genomweiten Maßstab. Die primäre Einschränkung dieser Technologie ist der Bedarf an großen Mengen RNA für die Array-Hybridisierung. Diese Hürde wird in der Regel durch die Verwendung von T7-RNA-Polymerasegeleiteter Transkription von cDNA (gewonnen aus Gesamt-RNA-Proben) zur Amplifikation ausreichender Mengen cRNA überwunden. Diese Amplifikationsmethode ist die Grundlage des MessageAmp II aRNA Amplifikationskits.
Ein verbessertes Kit für die cDNA-Amplifikation
Im Kit enthalten ist ArrayScript™ RT, eine rational konstruierte M-MLV reverse Transkriptase, die im Vergleich zu anderen Enzymen gleichwertige oder höhere Erträge an cDNA in voller Länge erzeugt. Die Verwendung von ArrayScript RT in Verbindung mit der Optimierung der Zweitstrang-cDNA-Synthesereaktion führt zu einer erhöhten Umwandlung von mRNA in zweisträngige cDNA-Templates mit voller Länge. Da bei der In-vitro-Transkription (IVT) die MEGAscript™ Technologie verwendet wird, werden außerdem die Inkubationszeiten bei IVT verkürzt. Diese Verbesserungen im MessageAmp II Kit reichen auch für Zwei-Runden-Reaktionen aus und ermöglichen so robuste Amplifikation der Gesamt-RNA aus Proben ab nur 100 pg.
Zubehörprodukte
Bio-11-UTP (Kat.- Nr. AM8450) und Bio-16-UTP (Kat.- Nr. AM8451) kann in MessageAmp aRNA-Amplifikationsreaktionen zur Zielmarkierung für die GeneChip-Analyse verwendet werden. Die Bio-UTPs sind frei von unspezifischer Endonuklease-Aktivität, Exonuklease-Aktivität und RNase-Aktivität und werden mit dem MessageAmp II aRNA Amplifikationskit funktionell getestet.
- Erhöhte Amplifikation: bis zu 5.000-fach
- Höhere Empfindlichkeit durch erhöhte Ausbeute an cDNA in voller Länge
- GeneChip-Analyse bereits ab 100 ng Eingangs-RNA
- Effiziente Kennzeichnung erzeugt hohe Prozentsätze an Calls und niedrige 3'/5'-Verhältnisse
- Enthält ArrayScript™ RT, eine speziell entwickelte M-MLV Reverse Transkriptase
- Optimierte cDNA-Synthesereaktion des zweiten Stranges
Expressionsarray-Markierung, Genexpressionsanalyse und Genotypisierung, Microarray-Analyse, RNA-Amplifikation
Bestellinformation
Versandbedingung: Zugelassen für den Versand auf Nass- oder Trockeneis
Spezifikation
Spezifikation
| Produkttyp | aRNA-Amplifikationskit |
| Inhalt und Lagerung | • 60 µl T7-Oligo(dT)-Primer (-20 °C) • 22 µl ArrayScript™ reverse Transkriptase (-20 °C) • 22 µl RNase-Inhibitor (-20°C) • 42 µl 10x Erststrang-Puffer (-20°C) • 170 µl dNTP-Gemisch (-20°C) • 210 µl 10x Zweitstrang-Puffer (-20°C) • 42 µl DNA-Polymerase (-20°C) • 22 µl RNase H (-20°C) • 84 µl T7-Enzymgemisch (-20°C) • 84 µl T7 10x Reaktionspuffer (-20°C) • 84 µl je T7 ATP, CTP, GTP und UTP (-20°C) • 40 µl Zweitzyklus-Primer (-20°C) • 10 µl 1 mg/ml-Kontroll-RNA (-20°C) • 1,75 ml nukleasefreies Wasser (beliebige Temperatur) • 30 ml Waschpuffer (4 °C oder Raumtemperatur) • 7 ml cDNA-Bindungspuffer (Raumtemperatur) • 9 ml aRNA-Bindungspuffer (Raumtemperatur) • 20 aRNA-Filterkassetten (Raumtemperatur) • 40 aRNA-Entnahmeröhrchen (Raumtemperatur) • 20 cDNA-Filterkassetten + Röhrchen (Raumtemperatur) • 20 cDNA-Elutionsröhrchen (Raumtemperatur) • 10 ml nukleasefreies Wasser (beliebige Temperatur) |
| Mit Marker oder Farbstoff | Nein |
| Reverse Transkriptase | ArrayScript™ |
| Probentyp | Poly(A+) RNA, Gesamt-RNA |
| Format | Kit |
| Produktlinie | Ambion™, MessageAmp™ |
| Menge | 20 Reaktionen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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