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Beschreibung
Maxima Reverse Transkriptase (RT) wurde durch In-vitro-Evolution von M-MuLV RT entwickelt. Das Enzym besitzt RNA- und DNA-abhängige Polymerase-Aktivität sowie RNase H-Aktivität. Das genetisch veränderte Enzym zeichnet sich im Vergleich zur Wildtyp M-MuLV RT durch eine wesentlich höhere Thermostabilität, Robustheit und cDNA-Syntheseraten aus.
Die Maxima Reverse Transkriptase ermöglicht reproduzierbare cDNA-Synthesen über einen großen Bereich von Gesamt-RNA-Mengen hinweg (von 1 pg bis 5 μg) und bei höheren Temperaturen (50 bis 65 °C) , was dieses Enzym zum idealen Hilfsmittel für zweistufige RT-qPCR macht (siehe unterstützende Daten).
Aufgrund seiner hohen Thermostabilität behält das Maxima-Enzym die volle Aktivität während der gesamten Reverse Transkriptionsreaktion bei, erzeugt die höchsten Erträge an cDNA und kann selbst sehr lange RNA-Transkripte bis 20 kb synthetisieren (siehe unterstützende Daten). Die Reaktionstemperatur kann zur effizienten Transkription von RNA-Bereichen mit einer hohen Sekundärstruktur oder zur Verbesserung der Spezifizität von genspezifischen Primern bis auf 65 °C erhöht werden. Aufgrund der erhöhten Syntheserate kann die reverse Transkriptionsreaktion in 15 bis 30 Minuten ausgeführt werden.
Thermo Scientific Maxima Umgekehrt Transcriptase (RT) wurde durch entwickelt in vitro – die Entwicklung von M-MuLV RT. Das Enzym besitzt RNA- und DNA-abhängige Polymerase-Aktivität sowie RNase H-Aktivität. Das künstlich hergestellte Enzym weist im Vergleich zur Wildtyp-M-MuLV-RT eine erheblich verbesserte Thermostabilität und Robustheit sowie erhöhte Zusammenfassungsraten auf.
Maxima Umgekehrt Transcriptase ist in der Lage, eine reproduzierbare cDNA-Synthese aus einer großen Auswahl an Gesamt-RNA-Einsatzmengen (von 1 pg bis 5 μg) bei erhöhten Temperaturen (50 –65 °C), was dieses Enzym zu einem idealen Werkzeug für die zweistufige RT-qPCR macht (siehe unterstützende Daten).
Aufgrund seiner hohen Thermostabilität Maxima Das Enzym behält während der gesamten Reverse-Transkriptionsreaktion die volle Aktivität, erzeugt die höchsten Ausbeuten an cDNA und ist in der Lage, selbst sehr lange RNA-Transkripte bis zu 20 kb zu synthetisieren. Die Reaktionstemperatur kann auf bis zu 65 °C erhöht werden°C zur effizienten Transkription von RNA-Regionen mit einer hohen Sekundärstruktur oder zur Verbesserung der Spezifität unter Verwendung genetischer spezifischer Primärstrukturen. Aufgrund der erhöhten Zusammenfassungsrate kann die Reverse-Transkriptase-Reaktion in 15 bis 30 Minuten abgeschlossen sein
Merkmale der Maxima Umgekehrt Transcriptase umfassen:
• Hohe Ausbeuten an cDNA voller Länge bis zu 20 kb
• Aktiv bis 65 Jahre°C
• Thermostabil— 90 % aktiv nach einer Inkubation bei 50 °C für 60 Minuten
• Die hohe Empfindlichkeit ermöglicht die reproduzierbare cDNA-Synthese aus einem weiten Bereich von Gesamt-RNA-Mengen (1 pg bis 5 μg)
• Effizienzende Formel für die vollständige cDNA-Synthese in 15 bis 30 Minuten
• Umfasst modifizierte Nukleotide
Anträge
• Zwei-Stufen-RT-PCR
• Zweistufiger RT-qPCR-Scan
• Erststrängige cDNA-Synthese
• Erstellung von cDNA-Sammlungssammlungen vollständiger Länge
• DNA-Markierung
• Grundverlängerung
Ebenfalls erhältlich
• Maxima Umgekehrt Transcriptase (Kat.-Nr. EP0741)
• Maxima First-Strand-cDNA-Synthese-Kit für RT-qPCR (Kat.-Nr. K1641)
• Maxima First-Strand-cDNA-Synthese-Kit für RT-qPCR, mit dsDNase (Kat.-Nr. K1671)
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 200 U/μl |
| Inhalt und Lagerung | 1 ml 5x RT-Puffer |
| Beschreibung | Mit 5x RT-Puffer (1 ml); 2.000 IE (200 HE/μL) |
| Produktlinie | Maxima Umgekehrt Transcriptase |
| Menge | 2.000 Einheiten |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | RT-PCR, cDNA-Synthese |
| Aktivierungszeit | 90 % aktiv nach einer Inkubation bei 50 °C für 60 Minuten |
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.
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