Thermo Scientific™ Maxima H Minus First Strand cDNA-Synthese-Kit

Im Kit ist Maxima H Minus Reverse Transkriptase (RT) enthalten – ein leistungsstarkes Enzym, das durch In-vitro-Evolution von M-MuLV RT hergestellt wird. Das Enzym zeichnet sich durch die höchste Thermostabilität unter den M-MuLV RT-Derivaten aus und hat keine RNase H-Aktivität. Das Maxima H Minus Erststrang-cDNA-Synthese-Kit ermöglicht die Synthese von langen cDNAs bis 20 kb bei erhöhten Temperaturen (bis 65 °C) und ersetzt die Fähigkeiten anderer Systeme zur Herstellung von cDNA in voller Länge. Durch höhere Syntheseraten kann die Reaktion in 30 Minuten abgeschlossen werden.
Das neue Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit mit dsDNase bietet einen wesentlich vereinfachten Arbeitsablauf, der aus der Beseitigung genomischer DNA und der cDNA-Synthese ein Ein-Röhrchen-Verfahren macht. Das Kit enthält eine neuartige, Doppelstrang-spezifische DNase (dsDNase), die entwickelt wurde, um kontaminierende genomische DNA aus RNA-Präparaten innerhalb von 2 Minuten zu entfernen, ohne die Qualität oder Menge der RNA zu beeinträchtigen. Die hochspezifische dsDNase-Aktivität gegenüber doppelsträngiger DNA gewährleistet, dass einzelsträngige DNA (wie cDNA und Primer) nicht gespalten wird und mit dsDNase behandelte RNA direkt zur reversen Transkription zugegeben werden kann.

Besondere Merkmale

• Integrierter Schritt zur Genom-DNA-Entfernung
• Höhere Reaktionstemperatur – der erste Strang der cDNA kann innerhalb des Temperaturbereichs von 42 bis 65 °C synthetisiert werden
  •Hohe Ausbeute an Erststrang-cDNA in voller Länge – mit RNA-Templates bis zu 20 kb
• Flexibles Priming – Oligo(dT)₁₈-, Random-Hexamer- oder genspezifische Primer

• Erststrang-cDNA-Synthese für RT-PCR
• Aufbau von cDNA-Bibliotheken
• Erzeugung von Sonden für die Hybridisierung
• Antisense-RNA-Synthese

• Das Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit enthält Maxima H Minus Enzymgemisch, Oligo(dT)₁₈- und Random-Hexamer-Primer, 5X RT-Puffer, dNTP-Gemisch und nukleasefreies Wasser.
• Das Maxima H Minus Erststrang-cDNA-Synthese-Kit mit dsDNase enthält zusätzlich zu den oben aufgeführten Komponenten dsDNase und 10x dsDNase-Puffer.

• Das Maxima H Minus Enzymgemisch enthält Maxima H Minus reverse Transkriptase und RiboLock RNase-Inhibitor. Der RiboLock RNase-Inhibitor schützt RNA-Templates bei Temperaturen bis zu 55 °C wirksam vor dem Abbau durch die RNasen A, B und C.
• Oligo(dT)₁₈- und Random-Hexamer-Primer sind im Kit enthalten. Die Random-Hexamer-Primer binden nicht spezifisch und werden verwendet, um cDNA von allen RNAs in einer RNA-Gesamtpopulation zu synthetisieren. Der Oligo(dT)₁₈-Primer bindet selektiv an das 3'-Ende der Poly(A)-RNA, was dazu führt, dass cDNA nur von mRNA mit Poly(A)-Schwanz synthetisiert wird. Für die Synthese einer bestimmten Sequenz können zudem genspezifische Primer eingesetzt werden.
• Das 10 mM dNTP-Gemisch ist eine vorgemischte, wässrige Lösung aus dATP, dTTP, dCTP und dGTP
• Zur Reaktionsvorbereitung und Verdünnung der Proben-DNA ist Nuklease-freies Wasser im Lieferumfang enthalten. Mit Hilfe geeigneter Qualitätsprüfungen wurde sichergestellt, dass keine Endo-, Exodesoxyribonucleasen, Ribonukleasen und Phosphatasen vorhanden sind. †Beachten Sie, dass sich der Name dieses Produkts geändert hat. Der bisherige Name ist Revertaid Premium First Strand cDNA Synthes

Gefahrstoff: Nein
Qualitätskontrolle: Funktionell getestet in RT-PCR unter Verwendung von 100 fg GAPDH-RNA-Kontrolle und GAPDH-Kontrollprimer, erzeugen nach der Ethidiumbromid-Färbung ein prominentes 496 bp-Produkt auf 1%igem Agarose-Gel.
Lagerungsbedingungen: -20 °C