Invitrogen™ LentiArray™ Human Ion Channel CRISPR Library

Beschreibung

Die ausgezeichnete Invitrogen™ LentiArray™ Human Ion Channel-Bibliothek zielt auf 328 Gene mit bis zu 4 gRNA pro Genziel (in einem einzigen Well zusammengefasst) für insgesamt 1.312 gRNAs ab. Bibliotheken werden mit einem durchschnittlichen Titer von 1x10⁸ TU/ml (funktionaler Titer, der durch Antibiotikaresistenz bestimmt wird) mit 100 μl gebrauchsfertigen lentiviralen Partikeln pro Genziel geliefert.

Ionenkanäle sind integrierte Membranproteine, die den elektrochemischen Gradienten herstellen, der sowohl das ruhende Membranpotenzial als auch die Bildung von Aktionspotenzialen zur Folge hat, die für die Nervenleitung und Herz- und Muskelkontraktion sowie andere Prozesse wie Insulinfreisetzung und Aktivierung von T-Zellen von entscheidender Bedeutung sind. Die Genziele in dieser Bibliothek wurden unter Verwendung der aktuellsten Genomdatenbanken, darunter die NCBI RefSeq Datenbank, ausgewählt und auf die Gene Ontology Consortium (GO) Datenbank und/oder das HUGO Gene Nomenclature Committee (HGNC) verwiesen.

Für Ihren Erfolg gebaut
LentiArray CRISPR-Bibliotheken wurden mit gRNA-Designs erstellt, die mit dem firmeneigenen Thermo Fisher Scientific’ CRISPR gRNA-Designalgorithmus hergestellt wurden. Dieser Algorithmus umfasst die neueste gRNA-Designforschung sowie unsere umfangreiche Erfahrung im eigenen Unternehmen, um Designs höchster Qualität zu erstellen. Die in den LentiArray CRISPR-Bibliotheken enthaltenen gRNA-Designs werden für maximale Bearbeitungseffizienz und Spezifität ausgewählt und sind so konzipiert, dass alle bekannten Isoformen des Zielgens herausgeknockt werden. Für jedes Genziel sind bis zu vier hochwertige gRNAs enthalten, um ein hocheffizientes Knockout des Zielgens in einer Vielzahl von Zelltypen zu gewährleisten.

Entwerfen und führen Sie Ihre Experimente ohne Einschränkungen durch
LentiArray CRISPR-Bibliotheken wurden entwickelt und erstellt, um Ihnen die vollständige Kontrolle über Ihr experimentelles Design zu geben. Verwendet wird ein Zwei-Vektor-Design, das die Cas9-Nuklease und die gRNA aus separaten lentiviralen Konstrukten exprimiert, sodass Sie bestimmen können, wann und wie die Genombearbeitungswerkzeuge auf Ihre Zellen einwirken.

Das LentiArray Cas9 Lentivirus-Konstrukt drückt eine humane, codon-optimierte Cas9-Nuklease mit einem Blasticidin-Resistenz-Gen unter der Kontrolle des EF-1-(EFS)-Promotors aus. Sie können Ihre Zellen sowohl mit den LentiArray gRNA-Lentiviren als auch mit dem Cas9-Lentivirus oder nur mit dem LentiArray Cas9-Lentivirus koinfizieren, um eine stabile Cas9-exprimierende Zelllinie herzustellen. Die LentiArray CRISPR-Bibliotheken bieten Ihnen die Freiheit, den experimentellen Ansatz zu entwerfen, der am besten zu Ihrem Modellsystem und Ihren Screening-Zielen passt.

Außerdem enthalten die gRNA-Lentiviren, aus denen die LentiArray CRISPR-Bibliotheken bestehen, keine fluoreszierenden Marker, sodass Ihre experimentellen Designs keinen Einschränkungen unterliegen. Dadurch können Reporter jeder Wellenlänge mit den Bibliotheken verwendet werden und Ihre Fähigkeit, Multiplex-Experimente durchzuführen, wird erweitert. Für anspruchsvolle Zelllinien enthalten die LentiArray gRNA-Lentiviren ein Puromycin-Resistenzgen, das eine Anreicherung der Population der bearbeiteten Zellen ermöglicht und stärkere Phänotypen fördert.

Optimieren Sie Ihr Assay-Design und vertrauen Sie voll und ganz auf Ihre Ergebnisse mit LentiArray Kontrollen
Hohe Qualitätskontrollen sind der Grundstein für ein erfolgreiches Screening. Die Produktlinie der LentiArray CRISPR-Bibliotheken umfasst eine Reihe von Kontrollen, die Ihnen bei der schnellen Entwicklung Ihres Assays helfen und Ihnen bei der Definition Ihrer Trefferkriterien Sicherheit geben.