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Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET PPAR Alpha Co-Aktivator Assay-Kit, Kaninchen
LanthaScreen™ TR-FRET PPAR Alpha Co-Aktivator Assay-Kit, Kaninchen
Marke: Invitrogen™ A15133
Additional Details : Gewicht : 0.09000kg
Beschreibung
Dieses Kit enthält Kaninchen-Tb-Anti-GST-Antikörper; andere Kit-Komponenten sind identisch mit Kit PV4684:Der LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assay für PPAR (Peroxisomproliferator-aktivierter Rezeptor)-alpha bietet eine empfindliche und robuste Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller PPAR-alpha-Liganden als Agonisten oder Antagonisten der Liganden-abhängigen Koaktivator-Rekrutierung. Das Kit verwendet einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid und eine humane rekombinante PPAR-alpha-Liganden-bindende Domäne (PPAR-alpha-LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) getaggt ist, im Format eines Assays mit einem homogenen gebrauchsfertigen Gemisch.
Agonisten-Modus:
Bei der Ausführung des LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assays für PPAR-alpha im Agonisten-Modus (zum Nachweis von Agonistenverbindungen) wird PPAR-alpha-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einem Gemisch aus dem Fluorescein-Koaktivatorpeptid und dem Tb-markierten Anti-GST-Antikörper. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das 520 nm/495 nm-TR-FRET-Verhältnis berechnet und kann zur Bestimmung der EC50 aus einer Dosis-Reaktions-Kurve der Verbindung verwendet werden. Basierend auf der Biologie der PPAR-alpha-Koaktivatorpeptid-Interaktion ist die EC50 dieses Liganden ein zusammengesetzter Wert für die Menge des Liganden, die für die Bindung an den Rezeptor, für eine Konformationsänderung und die Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist (siehe Abb. 1).
Antagonisten-Modus:
Bei der Ausführung des LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assays für PPAR-alpha im Antagonisten-Modus (zum Nachweis von Antagonistenverbindungen) wird PPAR-alpha-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einem Gemisch aus dem Agonisten, Fluorescein-Koaktivatorpeptid und dem Tb-markierten Anti-GST-Antikörper (Abb. 2). Die in diesem Modus verwendete Konzentration von Agonisten ist die EC80-Konzentration, die durch die erste Ausführung des Assays im Agonisten-Modus bestimmt wird.
Inhalt und Lagerung:
Das LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assay-Kit für PPAR-alpha enthält das PPAR-alpha-LBD (GST)-Protein, fluoreszierend markiertes PGC1a-Koaktivatorpeptid, Tb-markierten Anti-GST-Antikörper und mehrere Puffer. Lagern Sie die Komponenten wie im Assay-Protokoll angegeben (-80 °C, -20 °C oder 4 °C).
Spezifikation
Grün | |
Fluoreszent | |
Tb-anti-GST-Antikörper (Kaninchen), PPAR-Alpha-LBD, GST, Fluorescein-Coaktivator-Peptid, TR-FRET Coregulatorpuffer J, 1 M DTT | |
Nur für Forschungszwecke (RUO) | |
-80 °C/-20 °C/4 °C | |
LanthaScreen™ TR-FRET PPAR alpha Koaktivator-Assay-Kit |
LanthaScreen™ TR-FRET PPAR Alpha Co-Aktivator-Assay-Kit, 800 x 20 μl Assays, grün, 384-Well-Mikrotiterplatten-Format, Tb (Terbium)-Farbstofftyp, Fluoreszenzdetektionsmethode, TR-FRET-Technik, für Pharma und Biopharma, Target- und Bleiidentifizierung und -validierung | |
Mikrotiterplatten-Lesegerät | |
800 x 20 μl Assays | |
384-Well-Platte | |
Pharma und Biopharma, Arzneimittelforschung und -entwicklung, Identifizierung und Validierung von Ziel- und Leitstrukturen, Biologie der Kernrezeptoren, biochemische Kernrezeptorassays, Interaktion von Kernrezeptoren und Koregulatoren |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.