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Beschreibung
Klenow Fragment, exo-, ist das große Fragment der DNA-Polymerase I. Es weist 5'→3' Polymeraseaktivität auf, es fehlen jedoch die 3'→5' und 5'→3' Exonukleaseaktivitäten der DNA-Polymerase I. Die 3'→5' Exonukleaseaktivität des Enzyms wird durch Mutationen im 3'→5'-Exonuklease-aktiven Zentrum eliminiert.
Highlights
- Keine 3'→5'-Exonukleaseaktivität
- Enthält modifizierte Nukleotide (z. B. Cy3-, Cy5-, Rhodamin-, Aminoallyl-, Fluorescein-, Biotin-markierte Nukleotide)
- Aktiv in Restriktionsenzym-, PCR- und RT-Puffern
Anwendungen
- Random-primed DNA-Markierung
- Markierung durch Fill-in 5'-Überhänge von dsDNA
- Strangverdrängungsamplifikation (SDA)
- DNA-Sequenzierung nach der Sanger-Methode
Hinweis
Klenow-Fragment, exo- wird nicht für DNA-Blunting-Reaktionen vor der DNA-Ligation empfohlen, da es häufig dem 3‘-Terminus des Blunt-End DNA-Substrats ein oder mehrere Extra-Nukleotide hinzufügt, ohne dabei der Matrize zu folgen.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 5 U/μl |
| Polymerase | DNA Polymerase I |
| Kompatibler Puffer | Restriktionsenzym, PCR, RT-Puffer |
| Menge | 1500 U |
| Produkttyp | Klenow-Fragment |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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