Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit for Sequencing, with One Shot™ Mach1™ T1 Phage-Resistant Chemically Competent E. coli

Diese Kits enthalten alles Notwendige zur Klonierung und Selektion rekombinanter Vektoren, die das PCR-Fragment Ihrer Wahl enthalten. In jedem Kit wird der pCR™ 4Blunt TOPO Vektor mit speziell gestalteten Sequenzierungs-Primerstellen verwendet, die aus jeder Reaktion mehr Insertsequenz und weniger Vektorsequenz ergeben.
pCR4Blunt TOPO Vektor: Optimiert zur Sequenzierung
Ein Großteil der multiplen Klonierungsstellen wurde vom pCR4Blunt TOPO Vektor entfernt, um den Abstand zwischen Sequenzierprimer- und Insert-Stelle auf maximal 33 bp zu verkürzen. Dies bedeutet, dass Sequenzierreaktionen weniger Vektorsequenz und mehr Insertsequenz ergeben. Der pCR4Blunt TOPO Vektor bietet Bindungsstellen für vier standardmäßige Sequenzierprimer: M13 forward, M13 reverse, T7 und T3. Davon enthalten die Kits je einen Aliquot.
pCR4Blunt TOPO Klon-Selektion und -Manipulation
Der pCR4Blunt TOPO Vektor enthält Ampicillin- und Kanamycin-Resistenzmarker und eine LacZα-ccdB-Genfusion für die Positivselektion und das Blau-Weiß-Screening. Die minimierte multiple Klonierungsstelle des Vektors umfasst abgrenzende EcoRI-Schnittstellen für eine vereinfachte Exzision klonierter PCR-Produkte und eine einzigartige Sse8387I-Stelle für Nested Deletions vor der Sequenzierung. T7- und T3-Promoter sind auch für die In-vitro-Transkription vorhanden.
Vereinfachte TOPO basierte Klonierung
Mit dem TOPO Verfahren sind für die Klonierung weder PCR-Primer mit spezifischen integrierten Sequenzen, noch Post-PCR-Verfahren, eine Vektorpräparation oder andere zeitintensive Schritte zur DNA-Manipulation erforderlich. Geben Sie Ihre PCR-Reaktion einfach zum mitgelieferten Vektor mit gebundener Topoisomerase, warten Sie 5 Minuten, und führen Sie die Transformation in kompetente E. coli-Zellen durch.
Effiziente Klonierung
Mit bis zu 95 % der Klone, die das gewünschte Insert tragen, können Sie das Screening der Klone reduzieren und somit Zeit und Geld sparen. Der in diesem Kit verwendete pCR-4Blunt-TOPO Vektor enthält keine Überhänge für eine effiziente Ligation von PCR-Produkten, die durch thermostabile Proofreading-Polymerasen, PCR-Produkte mit stumpfem Ende generieren.
Der Standard für die Klonierung
Bei der Klonierung ist das TOPO Verfahren seit über zehn Jahren für Tausende von Wissenschaftlern ein verlässlicher Partner. Die schnelle, einfache und effiziente TOPO Klonierung kam bereits bei einer Vielzahl von Vektoren und in unterschiedlichsten Anwendungen zum Einsatz.
Das Zero Blunt TOPO PCR-Klonierungs­Kit für die Sequenzierung – Kit-Optionen
Das Zero Blunt TOPO PCR-Klonierungs-Kit für die Sequenzierung ist mit einer Vielfalt kompetenter Zellen erhältlich, die verschiedene Vorteile entsprechend Ihren Anforderungen bieten:

• Allgemeine Klonierung: TOP10 (Kat.-Nr. K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Hocheffiziente Klonierung: TOP10 Electrocomp™ Zellen (Kat.-Nr. K2880-20, K2880-40)
• Klonierung allgemein, Resistenz gegen Bakteriophagen T1: DH5α-T1R (Kat.-Nr. K2895-20)
• Schnelles Wachstum: Mach1™-T1R chemisch kompetente E. coli (Kat.-Nr. K2835-20)

• Mehr Sequenzen: Sie erhalten mehr Insertsequenz und weniger Vektorsequenz als bei der Verwendung von standardmäßigen Sequenzierprimern

• Schnell und einfach: Von der PCR zum Klon in nur 3 Schritten und 5 Minuten
• Effizient: Bis zu 95 % Klone mit dem korrekten Insert
• Bewährt: Zuverlässige Leistung seit über einem Jahrzehnt mit über 4000 Referenzen

• Vektor: pCR4Blunt TOPO Vektor: Optimierter Klonierungsvektor für verbesserte Sequenzierungsergebnisse
• KLONIERUNGSMETHODE: TOPO Cloning: Topoisomerase-I-basierte 5-minütige Ligation von durch Proofreading-Polymerase amplifizierten PCR-Produkten mit stumpfen Enden zum Vektor
• KOMPETENTE ZELLEN: Verschiedene Optionen: Wählen Sie aus den Kits mit allgemeinen, hocheffizienten, bakteriophagen T1-resistenten oder schnell wachsenden kompetenten Zellen

Chromatin-Biologie, Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP), Klonierung, Methylierungsanalyse, PCR-Klonierung, RNAi, Epigenetik und Non-Coding RNA-Forschung, Sequenzierung von Bisulfit-Treated DNA