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Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR-Klonierungskit, mit One Shot™ TOP10 chemisch kompetenten E. coli-Zellen
Artikelnummer. 10256812
Marke: Invitrogen™ K280020
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Beschreibung
Includes
Linearized and topoisomerase I-activated pCR™Blunt II-TOPO™ vector; Salt solution; dNTPs; Control template; M13 forward and reverse primers; Sterile water; One Shot™ Chemically Competent or Electrocomp™ E. coli; S.O.C. medium; Supercoiled pUC19 control plasmid
- Jedes Kit enthält den Zero Blunt™ TOPO™ Vektor mit dem Gen ccdB für positive Selektion, das nur Wachstum von rekombinanten Plasmidvektoren zulässt.
- Erhältlich mit einer Vielzahl von kompetenten Zellen oder ohne kompetente Zellen
- Schnell und einfach — von der PCR zu den Klonen in nur drei Schritten, einschließlich einer 5-minütigen Klonierungsreaktion
- Effizient — bis zu 95 % der Klone mit dem korrekten Insert
- Bewährt — zuverlässige Leistung seit mehr als zehn Jahren und mit über 20.000 Referenzen
- Einfach — keine Ligase, Post-PCR-Verfahren oder PCR-Primer mit bestimmten Sequenzen erforderlich
- Präzise — für die Verwendung mit High-Fidelity-DNA-Polymerasen ist kein A-Überhang am PCR-Produkt erforderlich
- Der pCR™ Blunt II-TOPO™ Vektor ist für das Klonen von PCR-Produkten mit stumpfem Ende ausgelegt, die durch thermostabile Proofreading-Polymerasen wie Platinum™ Pfx DNA-Polymerase generiert werden.
- Möglichkeit der direkten Auswahl von Rekombinanten durch Trennung des tödlichen E. coli-Gens ccdB. Der Vektor enthält das Gen ccdB, das mit dem C-Terminus des LacZα-Fragments fusioniert. Die Ligation eines PCR-Produkts mit stumpfem Ende unterbricht die Expression der LacZα-ccdB-Genfusion, wodurch nur das Wachstum von positiven Rekombinanten nach der Transformation ermöglicht wird. Zellen, die einen nicht rekombinanten Vektor enthalten, werden nach dem Auftragen auf Platten abgetötet. Aus diesem Grund ist kein Blau-Weiß-Screening erforderlich.
- Mit dem TOPO™ Verfahren sind für die Klonierung weder PCR-Primer mit bestimmten Sequenzen noch post-PCR-Verfahren, eine Vektor-Vorbereitung oder andere zeitintensive Schritte zur DNA-Manipulation erforderlich. Fügen Sie dem mitgelieferten Vektor mit gebundener Topoisomerase einfach Ihre PCR-Reaktion hinzu, warten Sie 5 Minuten, und führen Sie die Transformation in kompetente E. coli-Zellen durch.
- Zero Blunt™ TOPO™ PCR-Klonierungskits zur direkten Einführung von PCR-Produkten mit stumpfem Ende in einen Plasmidvektor können mit einer Vielzahl kompetenter Zellen, die sich durch unterschiedliche Vorteile auszeichnen, gekauft werden
Bestellinformation
Versandbedingung: Trockeneis
Spezifikation
Spezifikation
| Bakterien- oder Hefenstamm | TOP10 |
| Zelltyp | Chemically Competent |
| Klonierungsmethode | Blunt TOPO™ |
| Inhalt und Lagerung | Box 1: • Linearisiertes und Topoisomerase I-aktiviertes pCR™ Blunt II-TOPO™ Vektor • Salzlösung • dNTPs • Kontroll-Template • M13-Vorwärts- und Rückwärtsprimer • Steriles Wasser Bei -5 bis -30 °C lagern. Alle Reagenzien sind bei ordnungsgemäßer Lagerung 6 Monate stabil. Box 2: • One Shot™ chemisch kompetente oder Electrocomp™ E. coli • S.O.C.-Medium • Superhelikales pUC19-Kontrollplasmid Bei -68 bis -85 °C lagern. |
| Format | Kit |
| Produktlinie | One Shot™ |
| Produkttyp | PCR-Klonierungskit |
| Promoter | SP6 |
| Menge | 25 Reaktionen |
| Vektor | Blunt DNA-Klonierungsvektoren |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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