Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

Beschreibung

Die T7- und Sp6-Promoter des pCR II Vektors ermöglichen die In-vitro-Transkription des Inserts für die Herstellung von Sense- bzw. Antisense-Produkten. Das TA Cloning Kit Dual Promoter verwendet den pCRII Klonierungsvektor und ExpressLink T4 DNA Ligase, um ein Ligationsprodukt in einem Ligationsschritt von fünfzehn Minuten bei Raumtemperatur zu erzeugen. Reaktionen erbringen in der Regel >80 % Rekombinationen mit Inserts.

• Schnell und bequem: Ligation bei Raumtemperatur in 15 Minuten
• Effizient: Blau/Weiß-Screening und >80 % Klone mit korrektem Insert
• Flexibel: Wahl von Kanamycin- oder Äsculin-Resistenz für eine flexible Antibiotika-Auswahl
• Sorgenfrei: Eliminiert jegliche enzymatischen Änderungen des PCR-Produkts
• Optimiert: Erfordert keine Verwendung von PCR-Primern, die Restriktionsstellen enthalten
• 3'-T-Überhänge für die direkte Ligation von Taq-amplifizierten PCR-Produkten
• T7 und Sp6-Promoter zur In-vitro-RNA-Transkription und -Sequenzierung
• Vielseitige Polylinker mit flankierenden EcoR I-Stellen für eine einfache Exzision von Inserts
• M13 Vorwärts- und Rückwärts-Primerstellen für die Sequenzierung

• Funktionsweise von TA Cloning\
• Taq-Polymerase hat eine nicht Template-abhängige Aktivität, die ein Einzel-Desoxyadenosin (A) an den 3'-Enden von PCR-Produkten einfügt
• Der linearisierte Vektor in diesem Kit weist Rückstände von Einzel-3'-Desoxythymidin (T) auf.
• Auf diese Weise können PCR-Inserts effizient mit dem Vektor ligiert werden
• Kit-Konfigurationen
• Das TA Cloning Kit ist in einer Vielzahl von Konfigurationen erhältlich: mit One Shot INVF‘ chemisch kompetentem E. Coli (K2050-01 and K2050-40), One Shot TOP10F' chemisch kompetentem E. coli (K2060-01 und K2060-40) sowie ohne kompetente Zellen (K2750-20 und K2750-40) in Packungsgrößen mit 20 oder 40 Reaktionen.

Klonierung, PCR-Klonierung