Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli

Das TA Cloning™ Kit verwendet den pCR™2.1 Klonierungsvektor und ExpressLink™ T4 DNA Ligase, um ein Ligationsprodukt in einem Ligationsschritt von fünfzehn Minuten bei Raumtemperatur zu erzeugen. Reaktionen erbringen in der Regel >80 % Rekombinationen mit Inserts.

• Schnell & Praktisch – Ligation bei Raumtemperatur in 15 Minuten
• Effizient – Blau/Weiß-Screening und > 80 % Klone mit korrektem Insert
• Flexibel – Wahl von Kanamycin- oder Ampicillin-Resistenz für eine flexible Antibiotika-Auswahl
• Sorgenfrei – Eliminiert jegliche enzymatischen Änderungen des PCR-Produkts
• Optimiert – Erfordert keine Verwendung von PCR-Primern, die Restriktionsstellen enthalten

Der pCR™2.1 Vektor bietet:

• 3′-T-Überhänge für die direkte Ligation von Taq-amplifizierten PCR-Produkten
• T7 Promoter zur In-vitro-RNA-Transkription und -Sequenzierung
• Vielseitige Polylinker mit flankierenden EcoR I-Stellen für eine einfache Exzision von Inserts
• M13 Vorwärts- und Rückwärts-Primerstellen für die Sequenzierung

Funktionsweise von TA Cloning™
Taq-Polymerase hat eine nicht Template-abhängige Aktivität, die ein Einzel-Desoxyadenosin (A) an den 3′-Enden von PCR-Produkten einfügt. Der linearisierte Vektor in diesem Kit weist Rückstände von Einzel-3′-Desoxythymidin (T) auf. Auf diese Weise können PCR-Inserts effizient mit dem Vektor ligiert werden.

Andere Kit-Konfigurationen
TA Cloning™ Kits sind außerdem ohne kompetente Zellen (K2020-20, K2020-40), mit One Shot™ INVF chemisch kompetentem E. coli (K2000-01, K2000-40) oder mit One Shot™ TOP10F chemisch kompetentem E. coli (K2030-01, K2030-40) erhältlich.