Invitrogen™ SuperScript™ III One-Step RT-PCR System mit Platinum™ Taq DNA Polymerase

Das SuperScript III 1-Schritt-RT-PCR-System mit Platinum Taq DNA-Polymerase verwendet eine praktische Ein-Schritt-Formulierung, um sowohl die cDNA-Synthese als auch die PCR-Amplifikation in einem einzelnen Röhrchen mit genspezifischen Primern und Ziel-RNAs, die entweder aus Gesamt-RNA oder mRNA stammen, durchzuführen. Das System verwendet eine Mischung aus SuperScript III reverse Transkriptase und Platinum Taq-DNA-Polymerase in einem optimierten Reaktionspuffer und kann eine Vielzahl von RNA-Zielsequenzen von 200 bp bis 4,5 kb erkennen. Die Menge des Ausgangsmaterials kann im Bereich von 0,01 pg bis 1 μg Gesamt-RNA liegen.

• Empfindlich – routinemäßiger Nachweis bis 0,01 pg Gesamt-RNA
• Anwenderfreundlichkeit – schnelles und praktisches Ein-Schritt-Verfahren mit weniger Variabilität zwischen Reaktionen
• Spezifität – Einsatz von SuperScript III RT zur cDNA-Synthese bei bis zu 55 °C für ein spezifischeres Priming mit genspezifischen Primern
• Amplikongröße – kompatible Erkennung von Zielen bis 4,5 kb Länge für größere Flexibilität

SuperScript III reverse Transkriptase SuperScript III reverse Transkriptase ist eine Version von M-MLV-RT, die zur Reduzierung der RNase H-Aktivität entwickelt wurde und eine höhere thermische Stabilität bietet. Das Enzym kann cDNA bei Temperaturen von 45 °C bis 60 °C synthetisieren und bietet höhere Spezifität, eine höhere cDNA-Ausbeute und mehr Produkt in voller Länge als andere reverse Transkriptasen. Da SuperScript III RT nicht signifikant von ribosomaler und Transfer-RNA gehemmt wird, kann sie für die Synthese von cDNA aus Gesamt-RNA verwendet werden. Platinum Taq DNA-Polymerase Platinum Taq DNA-Polymerase ist eine rekombinante Taq DNA-Polymerase mit proprietärem Antikörper, der die Polymerase-Aktivität bei Raumtemperatur blockiert. Die Aktivität wird wiederhergestellt, nachdem bei der Denaturierung während der PCR eine Temperatur von 94 °C erreicht wird. Dies bietet einen automatischen “Heißstart” in der PCR und dadurch eine höhere Empfindlichkeit, Spezifität und Ausbeute. Endproduktgröße: 4,5 kb oder weniger.

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