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Invitrogen™ Platinum™ PCR SuperMix
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:
100 Reaktionen
Beschreibung
Die Applied Biosystems™ AmpliTaq Gold™ DNA Polymerase ist eine chemisch modifizierte Form der AmpliTaq™ DNA Polymerase. Die thermische Aktivierung des Standard Hot-Start-Enzyms erhöht die Sensitivität bei Amplifikationen von Genen mit geringer Kopienzahl. Es eignet sich gut für Templates von einer Grösse von bis zu 3 kb.
Die Platinum™ Hot-Start-Technologie ermöglicht eine hohe Spezifität für eine höhere Ausbeute. Patentierte Antikörper binden an das aktive Zentrum der Polymerase und inhibieren dadurch die Enzymaktivität bei niedrigen Temperaturen. Über 90% der Polymeraseaktivität wird im ersten Denaturierungsschritt wiederhergestellt, im Gegensatz zu anderen Hot-Start-Verfahren, wo z.B. Modifikationen an der Polymerase selbst die Wiederherstellung der kompletten Aktivität verhindern (Bild 1). Die Platinum™ Hot-Start-Methode ist besonders geeignet für PCR-Methoden mit kurzen Protokollen.
Die AccuPrime Taq DNA-Polymerase sorgt für eine bessere spezifische Bindung von Primern und ermöglicht dadurch eine Genauigkeit, die mit anderen Hot-Start-Enzymen nicht erreicht werden kann. Zusammen mit dem Hot-Start-Antikörper liefert das patentierte AccuPrime Hilfsprotein eine zusätzliche Kontrolle gegen Mispriming durch Interaktionen von Template und Primern und erleichtert dem Primer die Bindung an seine spezifische Zielsequenz. AccuPrime ist ideal für anspruchsvolle PCR-Applikationen, wie z.B. Multiplex-PCR: In Bild 2 wurden bis zu 20 verschiedene Targetsequenzen amplifi ziert, alle zeigten nur eine spezifische Bande.
Bild 1: Die Reaktion wurde bei 94ºC im mitgelieferten Reaktionspuffer inkubiert. Aliquots wurden zu verschiedenen Zeitpunkten genommen und in einem Standard-Aktivitätstest bewertet.
Bild 2: Jede Spur von links nach rechts zeigt die wachsende Zahl an Primer-Paaren (1 bis 20), eingesetzt in einem 50uL PCR-Reaktionsgefäss. Die PCR wurde auf Eis pipettiert, verwendet wurden 200 ng K562 humane genomische DNA und 5 units AccuPrime Taq DNA-Polymerase. Das Protokoll enthielt 35 Zyklen (94ºC 15 Sekunden, 60ºC 30 Sekunden, 68ºC 60 Sekunden).
Puffer I: beinhaltet bereits 15 mM MgCl2
Puffer II: mit separater 25 mM MgCl2-Lösung
Hersteller: 11306016 Art.-Nr.
Beschreibung: Platinum™ PCR SuperMix
Packung: 100 rxns
Die Platinum™ Hot-Start-Technologie ermöglicht eine hohe Spezifität für eine höhere Ausbeute. Patentierte Antikörper binden an das aktive Zentrum der Polymerase und inhibieren dadurch die Enzymaktivität bei niedrigen Temperaturen. Über 90% der Polymeraseaktivität wird im ersten Denaturierungsschritt wiederhergestellt, im Gegensatz zu anderen Hot-Start-Verfahren, wo z.B. Modifikationen an der Polymerase selbst die Wiederherstellung der kompletten Aktivität verhindern (Bild 1). Die Platinum™ Hot-Start-Methode ist besonders geeignet für PCR-Methoden mit kurzen Protokollen.
Die AccuPrime Taq DNA-Polymerase sorgt für eine bessere spezifische Bindung von Primern und ermöglicht dadurch eine Genauigkeit, die mit anderen Hot-Start-Enzymen nicht erreicht werden kann. Zusammen mit dem Hot-Start-Antikörper liefert das patentierte AccuPrime Hilfsprotein eine zusätzliche Kontrolle gegen Mispriming durch Interaktionen von Template und Primern und erleichtert dem Primer die Bindung an seine spezifische Zielsequenz. AccuPrime ist ideal für anspruchsvolle PCR-Applikationen, wie z.B. Multiplex-PCR: In Bild 2 wurden bis zu 20 verschiedene Targetsequenzen amplifi ziert, alle zeigten nur eine spezifische Bande.
Bild 1: Die Reaktion wurde bei 94ºC im mitgelieferten Reaktionspuffer inkubiert. Aliquots wurden zu verschiedenen Zeitpunkten genommen und in einem Standard-Aktivitätstest bewertet.
Bild 2: Jede Spur von links nach rechts zeigt die wachsende Zahl an Primer-Paaren (1 bis 20), eingesetzt in einem 50uL PCR-Reaktionsgefäss. Die PCR wurde auf Eis pipettiert, verwendet wurden 200 ng K562 humane genomische DNA und 5 units AccuPrime Taq DNA-Polymerase. Das Protokoll enthielt 35 Zyklen (94ºC 15 Sekunden, 60ºC 30 Sekunden, 68ºC 60 Sekunden).
Puffer I: beinhaltet bereits 15 mM MgCl2
Puffer II: mit separater 25 mM MgCl2-Lösung
Hersteller: 11306016 Art.-Nr.
Beschreibung: Platinum™ PCR SuperMix
Packung: 100 rxns
Spezifikation
Spezifikation
| Inhalt und Lagerung | Platinum PCR SuperMix is supplied at 1.1X concentration to allow approximately 10% of the final reaction volume to be used for the addition of primer and template solutions. Reagents sufficient for 5000 amplification reactions of 50μL each are provided. Platinum PCR SuperMix Components: 22U/mL complexed recombinant Taq DNA polymerase with Platinum Taq Antibody, 22mM Tris-HCl (pH 8.4), 55mM KCl, 1.65mM MgCl2, 220μM dGTP, 220μM dATP, 220μM dTTP, 220μM dCTP, and stabilizers. 100 rxns: 4 x 1.125mL |
| Menge | 100 reactions |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Real-Time PCR (qPCR), Standard-PCR |
| Anzahl Reaktionen | 100 |
| Überhang | 3'-A |
| Größe (Endprodukt) | 5kb or less |
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