Invitrogen™ pcDNA™4/TO Mammalian Expression Vector

• Verwendet einen Repressormechanismus, der die Transkription des leistungsstarken CMV-Promotors ohne Tetracyclin blockiert
• Da diese Elemente des T-REx Systems keine viralen Transaktivatoren nutzen, können Benutzer ohne sekundäre, nicht spezifische Aktivierung von Wirtsgenen eine starke Expression des kompletten CMV-Promotors erzielen
• Zwischen der TATA-Box des CMV-Promoters und der transkriptionellen Startstelle wurden zwei Tetracyclin-Operatorsequenzen (TETO₂) eingefügt: Die Teto₂-Sequenz selbst hat keine Auswirkung auf die Expression. Wenn Tetracyclin-Repressor-Protein (TR) vorhanden ist, bindet sie effektiv Teto₂-Stellen und blockiert die Transkriptionsinitiation
• Tetracyclin, das dem Kulturmedium hinzugefügt wird, bindet sich an das TR-Protein und ändert die Konformation des TR-Proteins
• Diese Änderung führt dazu, dass das TR-Protein Teto₂-Stellen freisetzt, wodurch die Transkription vom CMV-Promotor für eine hochstufige Expression von interessieranten Genen entdrosselt wird
• Die Expressionsebenen können basierend auf der Tetracyclinkonzentration moduliert werden und auf mit konstitutiven CMV-Expressionsvektoren erreichten Ebenen induziert werden
• Hygromycin-Resistenzgen Zeocinor für eine effektive Auswahl stabiler Säugetierzelllinien
• Große Mehrfach-Klonierungsstelle für einfacheres Klonieren

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