Invitrogen™ BaculoDirect™ C-Term Transfection Kit

• Entwickelt für attR-Stellen für eine schnelle und effiziente Rekombination mit Gateway Entry-Klon
• Das Gen von Interesse wird mit einer einfachen einstündigen LR-Reaktion vom Entry-Klon in BaculoDirect Linear DNA rekombiniert.
• Der resultierende Reaktionsmix enthält rekombinantes Baculovirus, das das Gen von Interesse trägt, und wird direkt zur Transfektion von Insektenzellen verwendet
• Eliminiert die Notwendigkeit, Bakterien zu transformieren und große Bacmid- oder Co-Transfektion von Transfervektor und linearer Baculovirus-DNA in Insektenzellen zu isolieren, um die Bearbeitungszeit zu verkürzen
• Gereinigtes Baculovirus kann in weniger als einer Woche isoliert werden

• Gateway lineare DNA: Entwickelt für schnelles Klonen mit Gateway-Entry-Klon und anschließender Expression in Sf9- oder Sf21-Insektenzellen
• Starker Polyhedrin-Promoter für High-Level-Expression
• R-Standorte für eine effiziente Rekombination mit attL-flankierten Gateway Entry-Vektor
• TK-Gen für Negativselektion mit Ganciclovir
• N-terminal-V-H5is-Tag für den Nachweis mit Anti-V-Antikörper von Invitrogen und Aufreinigung mit Nickel-Chelator-Harz (BaculoDirect N-Term Linear DNA)
• TEV-Protease-Spaltstelle zur Entfernung des V5-His-Tag nach der Aufreinigung (BaculoDirect N-Term Linear DNA)
• C-terminal-V-His-Tag für den Nachweis mit Anti-V5-Antikörper von Invitrogen und Aufreinigung mit Nickel-Chelator-Harz (BaculoDirect C-Term Linear DNA)

Baculovirus-Produktion und -Titration, Klonierung, Gateway Klonierung, Insektenexpression, Proteinexpression, Proteine, Expression, Isolierung und Analyse