Ratten-IgG2b kappa, APC-eFluor 780, Klon: eB149/10H5, Isotypkontrolle, eBioscience™

Beschreibung

Der Isotyp eines primären Antikörpers und die Anwendung, in der er eingesetzt wird, können zu einer Hintergrundfärbung führen. Primärantikörper-Hintergrundrauschen kann durch Bindung an Fc-Rezeptoren in Zielzellen, durch unspezifische Interaktionen mit zellulären Proteinen, Kohlenhydraten und Lipiden oder durch Zellautofluoreszenz verursacht werden. Isotyp-Kontrollantikörper können als Negativkontrollen dienen, um nicht-spezifische Hintergrundsignale von spezifischen Antikörpersignalen zu unterscheiden, da sie keine relevante Spezifität zu einem Zielantigen haben. Auch wenn Isotypkontrollen am häufigsten in der Durchflusszytometrie eingesetzt werden, sind sie auch in anderen Anwendungen wie der Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP), der Immunhistochemie und Gelverschiebungen nützlich. Die Isotypkontrollen sollten mit der primären Antikörperart und dem Isotyp übereinstimmen, damit der Gehalt an spezifischer Färbung durch den primären Antikörper genau bestimmt werden kann. Wenn direkt markierte primäre Antikörper verwendet werden, funktioniert die Isotypkontrolle am besten, wenn sie mit demselben Marker wie der Testantikörper konjugiert wird.

Beschreibung: Der monoklonale Ratte-IgG2b-kappa-Antikörper ist als Isotypkontroll-Immunglobulin einsetzbar. Berichtete Anwendungen: Es wurde von der Verwendung von APC-eFluor™ 780 Ratte-IgG2b-Isotypkontrolle (als Ersatz für APC-Alexa Fluor™ 750) in der durchflusszytometrischen Analyse berichtet. Getestete Anwendungen: Die Ratte-IgG2b-K-Isotypkontrolle APC-eFluor™ 780 wurde mittels durchflusszytometrischer Analyse an Maus-Splenozyten getestet. Verwenden Sie die Isotypkontrolle in derselben Konzentration wie den experimentellen Antikörper. APC-eFluor™ emittiert bei 780 nm und wird mit rotem Laser (633 nm) angeregt. Stellen Sie sicher, dass Ihr Gerät dieses Fluorochrom erkennt. Lichtempfindlichkeit: Dieses Tandem ist empfindlich gegenüber lichtinduzierter Oxidation. Dieses Fläschchen sowie gefärbte Proben müssen vor Licht geschützt werden. Fixierung: Die Proben können in IC-Fixierpuffer (Best.- Nr. 00-8222) (100 μl-Zellprobe+100 μl IC-Fixierpuffer) oder in 1-schrittiger Fixier-/Lyse-Lösung (Best.- 00-5333) für bis zu 3 Tage lichtgeschützt und bei 4 °C mit minimaler Auswirkung auf Helligkeit und FRET-Effizienz/Kompensation gelagert werden. In Bezug auf die Fluorophorleistung nach der Fixierung sind einige Verallgemeinerungen möglich, die klonspezifische Leistung jedoch sollte empirisch bestimmt werden. Anregung: 633-647 nm; Emission: 780 nm; Laser: Roter Laser. Filtration: Nach Herstellung mit 0.2 μm gefiltert.