Invitrogen™ IgG1 Human ELISA Kit

Beschreibung

The Human Immunoglobulin G1 (Hu IgG1) ELISA quantitates Hu IgG1 in human serum, plasma, or cell culture medium. The assay will exclusively recognize both natural and recombinant Hu IgG1. Principle of the method The Human IgG1 solid-phase sandwich ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) is designed to measure the amount of the target bound between a matched antibody pair. A target-specific antibody has been pre-coated in the wells of the supplied microplate. Samples, standards, or controls are then added into these wells and bind to the immobilized (capture) antibody. The sandwich is formed by the addition of the second (detector) antibody, a substrate solution is added that reacts with the enzyme-antibody-target complex to produce measurable signal. The intensity of this signal is directly proportional to the concentration of target present in the original specimen. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.

Der Isotyp eines primären Antikörpers und die Anwendung, in der er eingesetzt wird, können zu einer Hintergrundfärbung führen. Primärantikörper-Hintergrundrauschen kann durch Bindung an Fc-Rezeptoren in Zielzellen, durch unspezifische Interaktionen mit zellulären Proteinen, Kohlenhydraten und Lipiden oder durch Zellautofluoreszenz verursacht werden. Isotyp-Kontrollantikörper können als Negativkontrollen dienen, um nicht-spezifische Hintergrundsignale von spezifischen Antikörpersignalen zu unterscheiden, da sie keine relevante Spezifität zu einem Zielantigen haben. Auch wenn Isotypkontrollen am häufigsten in der Durchflusszytometrie eingesetzt werden, sind sie auch in anderen Anwendungen wie der Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP), der Immunhistochemie und Gelverschiebungen nützlich. Die Isotypkontrollen sollten mit der primären Antikörperart und dem Isotyp übereinstimmen, damit der Gehalt an spezifischer Färbung durch den primären Antikörper genau bestimmt werden kann. Wenn direkt markierte primäre Antikörper verwendet werden, funktioniert die Isotypkontrolle am besten, wenn sie mit demselben Marker wie der Testantikörper konjugiert wird.