Molecular Probes™ FluxOR™-Kalium-Ionenkanal-Assay

Beschreibung

• K⁺ Kanalspezifisch—Messen Sie den Ionenfluss sowohl in den mit Spannung als auch in den mit Liganden getriggerten Kaliumkanälen
• Schnell—Führen Sie Screenings im Hochdurchsatz-Modus mit reproduzierbaren Ergebnissen und hervorragender S/N-Qualität ohne Quenching durch
• Pharmakologisch relevant– bekannte Blocker zeigen in einem großen Signalfenster dosisabhängige Hemmung

Der FluxOR™ Kaliumionen-Kanalassay ist ein optisch basierter, homogener Assay für Hochdurchsatz-Screening-(HTS)-Messungen von Kaliumionen-Kanal- und Transporter-Aktivitäten. Der homogene Assay basiert auf der Permeabilität von Kaliumkanälen zu Thallium I. Wenn Kaliumkanäle durch einen Stimulus geöffnet werden, wird der Thalliumzufluss aus dem externen Medium mit einem hochempfindlichen Indikatorfarbstoff nachgewiesen. Das fluorogene Signal spiegelt quantitativ die Aktivität von Ionenkanälen und Transportern wider, die für Thallium vorgesehen sind, einschließlich hERG, Kir2.1 und anderer pharmakologisch wichtiger Kaliumkanäle. Fluoreszenz, die im FluxOR™ System berichtet wird, wird somit zu einem Ersatzindikator für die Aktivität von jedem Ionenkanal oder Transporter, der für Thallium durchlässig ist.

Der FluxOR™ Kaliumionen-Kanalassay ermöglicht ein schnelles und robustes Hochdurchsatz-Screening (HTS) von Kaliumkanalzielen in einer neuartigen Gleichgewichtsmessung, die reproduzierbar IC-Werte liefert,₅₀ die eine Vorhersage von Block oder Modulation in Plattformen mit geringerem Durchsatz ermöglichen. Der FluxOR™ Farbstoff ist so empfindlich, dass niedrige mM-Konzentrationen extrazellulären Thalliums im Hochdurchsatzmodus große Signale liefern. Für die meisten Anwendungen wird FluxOR™ Farbstoff in physiologischem HBSS-Puffer zum Laden in Zellen aufgelöst, unterstützt durch unsere firmeneigene Powerload™ Formulierung (Katalognummer P10020).

Der FluxOR™ Kaliumionen-Kanalassay bietet eine konzentrierte Thalliumlösung und alle erforderlichen Puffer, was maximale Zielflexibilität und einfache Anwendung in einem homogenen Format ermöglicht, das für die Verwendung mit Zellen demonstriert wurde, die hERG stabil exprimieren, sowie unser BacMam-hERG-Zufuhr- und Expressionsreagenz (Katalognummer B10019 und B10033). Optional zur Verwendung mit diesem Kit ist die in Invitrogen BacMam Zufuhr- und Expressionssystem entwickelte hERG Kaliumkanal-cDNA. Die Kombination aus einem hellen, firmeneigenen fluoreszierenden Kaliumsensorfarbstoff und dem von BacMam gelieferten hERG Kaliumkanalgen bietet eine hervorragende Flexibilität bei der Assay-Entwicklung und eine ausgezeichnete Empfindlichkeit bei der Erkennung von Kaliumkanalaktivitäten in biologisch relevanten Systemen unter physiologischen Bedingungen ohne Quencher.