Thermo Scientific™ PstI (10 U/μL)

5'..C T G C A▵G...3'

3'..G▵A C G T C...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität

• 1x Puffer O:50 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl₂, 100 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37°C inkubieren

Lagerungspuffer

• PstI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,15% Triton X-100, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden

• Nach 50-fachem Verdau mit PstI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA

• Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

Kompatible Enden

• Alw21I, ApaI, BseSI, Eco24I, Mph1103I, PstI, SacI, SdaI

Hinweis:

Ein hoher pH-Wert, eine geringe Salzkonzentration, hohe Glycerinkonzentration und 8 %DMSO können zu Star-Aktivität führen (Malyguine, E., et al., Gene, 8, 163-177, 1980). Umgebende Sequenzen: Das Vorliegen von angrenzenden G-C-Basenpaaren führt zu einer signifikanten Widerstandsfähigkeit gegenüber Spaltung (Armstrong, K. and Bauer, W.R., NAR, 10, 993-1007, 1982). 100 % Aufnahme von dUTP an der Erkennungsstelle reduziert die PstI-Spaltung auf 25 % (Glenn, T.C., et al., Biotechniques, 17, 1086-1090, 1994). PstI schneidet AGCTGCAG nicht, wenn es durch AluI-Methyltransferase methyliert wurde.