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Thermo Scientific™ PagI (BspHI) (10 U/μL)
Das Restriktionsenzym PagI (BspHI) erkennt T^CATGA-Stellen und schneidet am besten bei 37°C im O-Puffer (Isoschizomere: BspHI, CciI, RcaI).
Marke: Thermo Scientific™ ER1282
Additional Details : Gewicht : 0.00900kg
Beschreibung
Lambda-DNA, verdaut mit PagI (BspHI), 0,7 % Agarose, 3 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'...T▵C A T G A...3'
3'...A G T A C▵T...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- 1x Buffer O 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2, 100 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- PagI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden:
- Nach 50-fachem Verdau mit PagI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte:
- Dam: möglicherweise Überlappung — Spaltung behindert
- Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
- CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: möglicherweise Überlappung — Spaltung behindert
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Kompatible Enden:
- AflIII, PscI, DsaI, Eco130I, NcoI
Hinweis:
Eine geringe Salzkonzentration, eine hohe Glycerin-Konzentration (>5 %), ein pH-Wert von >8,0 oder ein hoher Enzymüberschuss können zu Star-Aktivität führen. Die Spaltung mit PagI wird durch überlappende dam-Methylierung behindert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dam-Methylierung einen dam-, dcm-Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099).
Spezifikation
10 U/μl | |
PagI (BspHI) | |
Ja | |
Nein | |
Restriktionsenzym |
Empfindlich für Dam-Methylierung, nicht empfindlich für CpG-Methylierung und Dcm-Methylierung, nicht empfindlich für CpG-Methylierung und Dcm-Methylierung, Not Dcm Methylation-Sensitive | |
10x Puffer O | |
37°C | |
2000 E | |
Herkömmliches Klonen |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.