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Thermo Scientific™ Esp3I (BsmBI) (10 U/μl)
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Lambda-DNA verdaut mit Esp3I (BsmBI), 1 % Agarose, 14 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'...C G T C T C (N)1▵...3'
3'...G C A G A G (N)5▵...5' Bedingungen für 100 % Aktivität:
- [1x Buffer Tango] + DTT: [33 mM Tris-Acetat (pH 7,9 bei 37°C), 10 mM Mg-Acetat, 66 mM K-Acetat und 0,1 mg/ml BSA]+ 1,0 mM DTT
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- Esp3I wird geliefert in: 10 mM Kaliumphosphat (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,5 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden:
- Nach 50-fachem Verdau mit Esp3I können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte:
- Dam: keine Überlappung – keine Auswirkung
- Dcm: keine Überlappung – keine Auswirkung
- CpG: vollständige Überlappung – blockiert
- EcoKI: keine Überlappung – keine Auswirkung
- EcoBI: möglicherweise Überlappung – Auswirkung unbestimmt
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 U der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Hinweis:
Das Enzym benötigt DTT. Frisch angesetztes DTT sollte dem Reaktionspuffer zugegeben werden. Esp3I spaltet flussabwärts von seinem Erkennungsort und kann jeden gewünschten 4-Base-5'-Überhang generieren. Diese Funktion ist für das Klonen von PCR-Produkten nützlich.
Specifications
Specifications
| Konzentration | 10 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Empfindlich für CpG-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, Not Dcm Methylation-Sensitive |
| Enzym | Esp3I (BsmBI) |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer Tango |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Ja |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Ja |
| Menge | 200 U |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Narbenloses Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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