Thermo Scientific™ BstXI (10 U/μL)

Beschreibung

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

5'...C C A N N N N N▵N T G G...3'

3'...G G T N▵N N N N N A C C...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität:

• b1X Puffer O: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl₂, 100 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 55°C inkubieren

Lagerungspuffer:

• BstXI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden:

• Nach 50-fachem Verdau mit BstXI können ungefähr 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte:

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: kann überlappen — Spaltung behindert
• CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:

• Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

   

Hinweis:

Inkubation bei 37°C ergibt 50% Aktivität. Ein mehr als 15-facher Überverdau mit BstXI kann zu Star-Aktivität führen. BstXI-Spaltung wird durch überlappende dcm-Methylierung behindert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dcm-Methylierung einen dam-, dcm-Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099).