Learn More
Thermo Scientific™ FastAP wärmeempfindliche alkalische Phosphatase (1 U/μl)
Alle ansehen Thermo Scientific ProdukteArtikelnummer. 10819230
Marke: Thermo Scientific™ EF0654
Log in om dit product te kopen Registreer vandaag om een webaccount aan te maken
BESTER Aktionspreis! Benutzen Sie den Promotions-Code "24110" um Ihren Promotions-Preis zu erhalten.
Beschreibung
FastAP Thermosensitive alkalische Phosphatase katalysiert die Abgabe von 5'- und 3'-Phosphatgruppen aus DNA, RNA und Nukleotiden. Dieses Enzym entfernt zudem Phosphatgruppen aus Proteinen.
FastAP ist eine neuartige alkalische Phosphatase, die in allen Thermo Scientific Restriktionsenzympuffern und PCR-Puffern aktiv ist. Es dephosphoryliert alle Arten von DNA-Enden (stumpfe, 5'- und 3'-Überhänge) in 10 Minuten bei 37°C. Das Enzym wird in 5 Minuten bei 75°C inaktiviert. Aus diesem Grund ist es nicht mehr erforderlich, die alkalische Phosphatase vor der Ligation zu entfernen.
Besondere Eigenschaften
- Rekombinantes Enzym
- Schnelle Dephosphorylierung – 10 Minuten bei 37 °C
- Rasche und vollständige Inaktivierung – 5 Minuten bei 75 °C
- Gleichzeitiger Verdau und Dephosphorylierung von Vektor-DNA
- 100 % aktiv in Restriktionsenzym- und PCR-Puffern
- Ein Protokoll für alle Arten von DNA-Enden:
- 5’-Überhänge
- 3’-Überhänge
- stumpfe Enden
- einzelne Nukleotide
- PCR-Aufreinigung in Verbindung mit Exo I
- Protein-Dephosphorylierung
Anwendungen
- Dephosphorylierung von Vektor-DNA zur Klonierung, um eine Rezirkulation während der Ligation zu verhindern.
- Gleichzeitiger Verdau und Dephosphorylierung von Vektor-DNA
- PCR-Aufreinigung: Nukleotidabbau vor der Sequenzierung des PCR-Produkts
- Dephosphorylierung von Nukleinsäure-5'-Termini vor der Markierung mit T4 Polynukleotid-Kinase
- Andere Anwendungen, bei denen Dephosphorylierung von DNA- und RNA-Substraten erforderlich ist
- Protein-Dephosphorylierung
Hinweis
- Die Bindung von FastAP temperaturempfindlicher alkalischer Phosphatase an die DNA kann zu einem Bandensprung des Agarose-Gels führen. Um dieses zu verhindern, inkubieren Sie die Proben 10 Minuten lang mit 6X DNA-Ladefarbstoff & SDS-Lösung bei 65 °C, und kühlen Sie sie anschließend auf Eis vor Ausführung der Elektrophorese.
- FastAP temperaturempfindliche alkaline Phosphatase ist in allen Restriktionsenzympuffern aktiv und kann direkt zu der verdauten DNA hinzugefügt werden. Eine Wärme-Inaktivierung des Restriktionsenzyms vor der Dephosphorylierungsreaktion ist nicht erforderlich.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 1 U/μl |
| Enzym | Phosphatase |
| Kompatibler Puffer | PCR-Puffer, Enzympuffer |
| Menge | 300 E |
| Produkttyp | Alkalische Phosphatase |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Bitte geben Sie uns Ihr Feedback zu den Produktinhalten, indem Sie das folgende Formular ausfüllen.